重组人甲硫氨酸硫氧化物还原酶的原核表达、纯化及鉴定

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目的:表达、纯化并鉴定人甲硫氨酸硫氧化物还原酶(hMsrA). 方法:将含有hMsrA基因的重组质粒转化大肠杆菌,经诱导表达,表达蛋白主要存在于上清中,经破菌、Ni-NTA Agarose亲和层析分离纯化目的蛋白. 结果:SDS-PAGE显示纯化的蛋白相对分子质量为26 000的单一条带;Western-blot鉴定该纯蛋白有免疫活性;酶活性测定表明,该纯化蛋白具有还原甲硫氨酸硫氧化物的能力. 结论:hMsrA能在原核体系中良好表达,经纯化后具有催化活性,为大量制备并进一步研究抗氧化剂在动脉粥样硬化中的作
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