论文部分内容阅读
目的
通过比较年轻与年老的快速老化鼠(senescence-accelerated mouse,SAM)耳蜗中基因表达水平,筛选并分析可能的与老年聋相关的基因.
方法将分别从2个月和12个月的SAM耳蜗中提取的总RNA合成cDNA,并与载有1101鼠基因的基因芯片进行杂交,杂交信号通过蓝色素-3荧光显色,并使用微机对其图像进行分析.通过实时定量逆转录聚合酶链式反应技术对其结果进行验证.用免疫荧光染色的方法,确定候选基因所编码的蛋白在耳蜗中的表达部位.
结果多数基因在老年耳蜗中的表达并没有明显的变化,本研究发现有3个基因的表达较年轻耳蜗中有明显的增加,通过定量逆转录聚合酶链式反应技术证实其中的胸腺素 beta4 mRNA过度表达.免疫荧光染色显示胸腺素beta4主要在耳蜗的盖膜及外毛细胞的支持细胞中表达.
结论通过生物芯片技术,显示老年鼠耳蜗中基因表达的情况,并发现胸腺素beta4有可能与老年聋相关.这一研究为探讨老年聋的分子生物学机制提供了参考.