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目的
探讨选择性过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)激动剂吡格列酮(PIO)对大鼠骨髓内皮祖细胞(EPCs)血管新生能力的影响及其机制。
方法采用密度梯度离心法和差速贴壁法培养大鼠骨髓EPCs，并使用双荧光染色的方法进行鉴定。将大鼠骨髓EPCs置于含0、1、10、50、100、200 μmol/L PIO的培养基中培养，检测EPCs的血管新生。将培养7 d的EPCs随机分5组：对照组加含二甲基亚砜的培养液；PIO组加入50 μmol/L PIO；PPARγ拮抗剂组加入50 μmol/L PIO及10 μmol/L PPARγ拮抗剂GW9662；磷酸肌醇3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)阻滞剂组加入50 μmol/L PIO及50 μmol/L PI3K/Akt通道阻滞剂Wortmannin；细胞外信号调节激酶(ERK)阻滞剂组加入50 μmol/L PIO及20 μmol/L ERK通道阻滞剂PD98059，检测EPCs的血管新生。
结果倒置显微镜下见培养前4 d细胞增殖不明显，第5～10天迅速增殖，并可见细胞集落及线状结构形成，第10天可达80%融合。培养第7天的EPCs具有吞噬Dil标记的乙酰化低密度脂蛋白和异硫氰酸荧光素(FITC)标记的荆豆凝集素1的功能。10～200 μmol/L的PIO均可明显促进EPCs的血管新生，以50 μmol/L PIO的作用最明显。进一步阻断相关信号通路发现，Wortmannin和GW9662可明显拮抗PIO的促细胞血管新生作用，而PD98059对PIO的作用无影响。说明PIO促进大鼠骨髓EPCs血管新生的作用是通过PI3K/Akt信号通路介导的。
结论PIO可促进EPCs的血管形成能力，这种作用可能是通过PI3K/Akt信号通路介导。