论文部分内容阅读
目的：克隆、表达、纯化人免疫缺陷病毒Ⅰ型（HIV-1）Vpu蛋白，为其功能及免疫学研究奠定基础。方法：PCR扩增Vpu基因，纯化、酶切后克隆到原核表达载体pET32a中，转化大肠杆菌BL21（DE3）菌株获得表达工程菌株，IPTG诱导蛋白表达，免疫印迹鉴定目的蛋白，亲和层析纯化蛋白。结果：构建了HIV-1Vpu蛋白的原核表达载体Vpu-pET32a，并在大肠杆菌中高效表达，目的蛋白呈可溶性形式存在，免疫印迹检测显示为目的蛋白，经Ni—NTAAgarose纯化获得了高纯度的目的蛋白。结论：在原核表达系统中表