【摘 要】
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目的 为研究中华真地鳖血淋巴(Eupolyphaga sinensis Walker hemolymph,ESWH)对人红白血病(human erythroleukemia,HEL)细胞增殖及凋亡的影响并探究其机制.方法 采用不同质量
【机 构】
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贵州大学昆虫研究所,贵州山地农业病虫害重点实验室,贵阳550025;贵州省中国科学院天然产物化学重点实验室,贵阳560014;贵州省中国科学院天然产物化学重点实验室,贵阳560014;贵州大学昆虫研究
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目的 为研究中华真地鳖血淋巴(Eupolyphaga sinensis Walker hemolymph,ESWH)对人红白血病(human erythroleukemia,HEL)细胞增殖及凋亡的影响并探究其机制.方法 采用不同质量浓度(10～60mg· L-1)的ESWH体外作用于人红白血病细胞(HEL细胞)细胞,利用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测定细胞增殖活性;Hoechst 33258和Annexin V-FITC荧光染色观察细胞凋亡的形态学变化;Annexin/PI法检测HEL细胞凋亡率;流式细胞仪分析HEL细胞周期分布;荧光定量PCR(RT-qPCR)和Western blot技术检测HEL细胞中Bcl-2,Bax,caspase-3,caspase-8,Cyt C的mRNA和蛋白的表达.结果 ESWH能够抑制HEL细胞增殖,并呈一定的时间和浓度依赖关系;ESWH能够引起HEL细胞发生G2/M期阻滞,促进细胞凋亡;qRT-PCR和Western blot结果表明,ESWH可下调HEL细胞中Bcl-2的mRNA和蛋白的表达水平(P＜0.01),上调Bax,Cyt C,cleaved caspase-3,cleaved caspase-8蛋白的表达水平(P＜0.01).结论 ESWH能抑制人红白血病HEL细胞增殖,并诱导其凋亡,其机制可能与激活线粒体凋亡通路有关.
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