【摘 要】
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目的:利用不同方法将梅花鹿鹿茸提取物(Pilose anlter extracts, PAEs)分成不同组分,用1-甲基-4-苯基吡啶离子(MPP+)诱导的PC12细胞损伤模型筛选并确定PAEs具有神经保护作用的活性组
【机 构】
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吉林农业大学中药材学院; 湖北工业大学; 中国中医科学院医学实验中心;
【基金项目】
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国家自然科学基金面上项目(81603285);北京自然科学青年基金面上项目(7184230,7192141);中央级公益性科研院所基本科研业务费专项资金资助(ZZ13-YQ-077)
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目的:利用不同方法将梅花鹿鹿茸提取物(Pilose anlter extracts, PAEs)分成不同组分,用1-甲基-4-苯基吡啶离子(MPP+)诱导的PC12细胞损伤模型筛选并确定PAEs具有神经保护作用的活性组分,为下一步的新药研发奠定基础。方法:按照本实验室专利方法提取PAEs,分别利用超滤离心、热处理的方法对PAEs进行处理,获得不同组分PAEs、PAEsH(热处理)、PAEs30(超滤离心分子量>30 kDa组分),分别观察其对MPP+诱导的PC12细胞损伤保护作用,并进一步追踪分离。选择活性最强组分PAEs30进一步加热、酶解处理后得到PAEs30-H(热处理)与PAEs30-E(酶解),分别观察其对MPP+诱导的PC12细胞损伤保护作用,并进一步追踪分离,最终确定有效活性组分。结果:与MPP+损伤的PC12细胞模型相比,0.5 mg/mL以上浓度PAEs、PAEs30可显著抑制MPP+对PC12细胞的损伤,其中PAEs30组分活性最强。对PAEs30进行热处理及酶解处理后(PAEs30-H与PAEs30-E),各组分对MPP+损伤的PC12细胞均有明显的神经保护作用,0.125 mg/mL及其以上浓度皆可显著提高细胞的相对生存率。结论:PAEs中具有MPP+诱导神经细胞损伤修复作用的活性成分初步鉴定为对热稳定、分子量为10 kDa或35 kDa的蛋白类成分。为后续的质量标准制定及提取工艺提供实验数据。
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