【摘 要】
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【目的】克隆、表达肠出血性大肠杆菌（EHEC）O157：H7转位紧密素受体（Tir）基因,并研究其抗原性。【方法】选用pET28原核表达载体,体外构建Tir原核表达重组菌,并在大肠杆菌中获得高效
【机 构】
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江苏省农业科学院兽医研究所/农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室/国家兽用生物制品工程技术研究中心
【基金项目】
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国家“十一五”科技支撑计划（2007BAD40B01）, 江苏省农业科技自主创新资金（cx（09）106）, 江苏省农业科学院后备人才基金（6510804）
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【目的】克隆、表达肠出血性大肠杆菌（EHEC）O157：H7转位紧密素受体（Tir）基因,并研究其抗原性。【方法】选用pET28原核表达载体,体外构建Tir原核表达重组菌,并在大肠杆菌中获得高效表达。选用家兔制备高滴度多克隆抗体,Western blot分析其免疫原性。选用HEp-2细胞进行粘附和粘附抑制试验,通过光镜、电镜和荧光显微镜进行观察。选用Balb/c小鼠进行免疫试验。【结果】成功获得高效表达重组Tir蛋白,并制备了兔源Tir多克隆抗体,Western blot分析此抗体能与Tir发生特异性抗原
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