【摘 要】
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目的 检测黏附分子CD44在正常和乳腺肿瘤细胞表面的表达,并分析其活化状态差异,为以CD44为靶点的肿瘤靶向治疗提供新的理论依据.方法 采用流式细胞术检测20名正常人外周血单
【机 构】
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上海交通大学附属第六人民医院中心实验室
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目的 检测黏附分子CD44在正常和乳腺肿瘤细胞表面的表达,并分析其活化状态差异,为以CD44为靶点的肿瘤靶向治疗提供新的理论依据.方法 采用流式细胞术检测20名正常人外周血单个核细胞(PBMCs)、正常小鼠胚细胞NIH3T3及人乳腺肿瘤细胞Hs578T、BT-549表面CD44表达水平;使用荧光标记透明质酸(FL-HA),通过流式细胞术分析CD44的活化状态;再运用细胞免疫荧光的方法观察HA与不同活化状态CD44的靶向结合情况.结果 正常人PBMCs、NIH3T3与乳腺肿瘤细胞Hs578T、BT-549表面均高表达CD44,阳性表达率>95%.PBMCs、NIH3T3的CD44与FL-HA结合活性相对较低,分别为(3.61±2.65)%和(14.33±1.35)%,而乳腺肿瘤细胞表面CD44与FL-HA结合活性高(>90%).细胞免疫荧光显示NIH3T3细胞表面基本无荧光,HA不靶向结合CD44,而Hs578T和BT-549细胞表面呈现强荧光,HA靶向结合CD44.结论 正常细胞PBMCs、NIH3T3表面虽然高表达CD44,但与其天然配体HA结合活性较低,而乳腺肿瘤细胞表面高表达CD44且与其配体HA结合活性很高.提示CD44分子在正常和肿瘤细胞表面存在相对静止与活化2种状态,前者与HA结合活性较低,后者与HA结合活性高.提示以HA为靶向分子、CD44为靶点的抗肿瘤药物,能够选择性杀伤高表达CD44的肿瘤细胞而不影响正常细胞.
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