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目的：构建人源化抗肝癌双价抗体，并实现其在大肠杆菌中的可溶牲表达．方法：缩短人源化抗肝癌单链抗体hscFv25的连接肽为5肽，构建(hscFv25)。基因，克隆入原核表达载体后，转化入大肠杆菌表达，并纯化目的蛋白，细胞ELISA、免疫组织化学法检测其生物活性．结果：目的基因在大肠杆菌中得到了可溶性表达，纯化蛋白的相对亲和力比亲本抗体提高了10倍左右，对肝癌组织切片的免疫组织化学染色呈强阳性，阳性率为75％．结论：成功制备了人源化抗肝癌双价抗体，该抗体具有较高的亲和力，为进一步的临床研究奠定了基础．