携带鸡贫血病毒凋亡素基因重组腺病毒质粒的构建及鉴定

来源 :实用癌症杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户：rrtaobao123

【摘要】

：

目的构建携带鸡贫血病毒凋亡素VP3基因的重组腺病毒质粒。方法设计VP3 c DNA扩增引物,从PET15b-VP3质粒中扩增VP3的DNA序列,与线性p Shuttle-IRES-hr GFP-2连接,PCR和EcoRⅤ

【作者】

：

邓守明蔡召忠

【机构】

：

中国五冶集团有限公司医院,湖北医药学院附属东风医院

【出处】

：

实用癌症杂志

【发表日期】

：

2015年7期

【关键词】

：

同源重组凋亡素腺病毒增强绿色荧光蛋白 Homologous recombination Apoptin Adenovirus Enhanced gr

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目的构建携带鸡贫血病毒凋亡素VP3基因的重组腺病毒质粒。方法设计VP3 c DNA扩增引物,从PET15b-VP3质粒中扩增VP3的DNA序列,与线性p Shuttle-IRES-hr GFP-2连接,PCR和EcoRⅤ酶切电泳鉴定;穿梭质粒p Shuttle-VP3-EGFP经Pmel酶切线性化后,转化含p Adeasy-1的超感受态BJ5183大肠杆菌,细菌内同源重组法构建重组腺病毒质粒p Ad-VP3-EGFP,质粒经PCR、Pac I酶切电泳及测序鉴定。结果线性化的p Shuttle-VP3-EG

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