论文部分内容阅读
目的:获得具有生物学活性的结核分枝杆菌(Mtb)重组泛酸激酶蛋白.方法:以结核分枝杆菌模式菌株H37Rv基因组为模板,扩增泛酸激酶基因CoaA(Rv1092c),克隆入原核表达载体pET28a中,重组质粒转入大肠杆菌BL21(DE3)中进行IPTG诱导表达.在优化后的诱导条件(20℃,10h,0.5mmol/L IPTG)下,收集细菌进行超声破碎,低温高速离心,得到的上清液经镍离子螯合型亲和层析柱纯化重组蛋白、高效液相色谱及质谱鉴定重组蛋白.采用酶联法测定重组蛋白的酶学性质.结果:得到了高表达、高纯度的重