【摘 要】
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为开发一种操作简便、省时省力、特异性强、敏感度高的猪瘟抗体检测方法,使其更适合于我国猪瘟防控需要,本研究采用真核系统表达纯化的猪瘟病毒E2蛋白作为包被物,辣根过氧化
【机 构】
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中国兽医药品监察所国家/OIE猪瘟参考实验室,北京海淀100081;洛阳莱普生信息科技有限公司,河南洛阳471000
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为开发一种操作简便、省时省力、特异性强、敏感度高的猪瘟抗体检测方法,使其更适合于我国猪瘟防控需要,本研究采用真核系统表达纯化的猪瘟病毒E2蛋白作为包被物,辣根过氧化物酶标记的E2蛋白单克隆抗体作为竞争抗体,化学发光底物作为显色体系,同时将猪瘟血清国家参考品作为溯源血清,绘制标准曲线,建立了猪瘟病毒化学发光竞争ELISA抗体检测方法.结果表明,该方法的敏感性为96.67%,特异性为96.68%;通过标准曲线的绘制,能够实现检测结果的相对定量;简化了操作步骤,检测时间大大缩短(<1 h/96样本).猪瘟病毒化学发光竞争ELISA抗体检测方法适合于猪瘟的田间大规模普查,能够提供更高的准确度,缩短检测时间,降低工作强度,减少人工成本,具有较好的应用前景.
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