【摘 要】
：
为制备表达大肠杆菌胞嘧啶脱氨酶(cytosine deaminase,CD)和单纯疱疹病毒-1-胸苷激酶(herpes simplex virus type-1 thymidine kinase,TK)双自杀基因的重组腺病毒载体,为再狭
【机 构】
：
中国医学科学院心血管病研究所,中国协和医科大学阜外医院,北京,100037
论文部分内容阅读
为制备表达大肠杆菌胞嘧啶脱氨酶(cytosine deaminase,CD)和单纯疱疹病毒-1-胸苷激酶(herpes simplex virus type-1 thymidine kinase,TK)双自杀基因的重组腺病毒载体,为再狭窄基因治疗的应用奠定基础,首先构建了含单、双自杀基因的腺病毒穿梭载体,细菌内同源重组法获得重组腺病毒质粒.脂质体介导下转染293细胞进行包装并大量扩增得到Ad-TK、Ad-CD、Ad-TK-CD、Ad-LacZ 4种重组腺病毒.氯化铯(CsCl)梯度离心法纯化后利用报告基因绿色荧光蛋白(GFP)测定病毒滴度,可达109 pfu/ml.PCR和Western印迹法对外源基因进行鉴定,证明单、双自杀基因均已整合入腺病毒基因组并表达.重组腺病毒感染血管平滑肌细胞后,用MTT法比较了单、双自杀基因的杀伤作用,发现在感染复数≤20时,双自杀基因对细胞的抑制作用明显高于单基因.成功地构建腺病毒双自杀基因共表达载体,为进一步的体内外实验奠定了基础.
其他文献
采用野外调查和比较分析的方法 ,对沙坡头地区人工植被油蒿种群的结构和更新进行了研究。通过对不同固沙起始年代油蒿种群大小结构的分析发现 ,幼树个体的数量较多 ,中等大小的成年个体数量少 ,老龄个体的数量极少。年限较短的人工植被区油蒿幼树个体的数量多于年限较长的人工植被区 ,而油蒿幼苗的数量则呈相反的趋势。油蒿幼苗在不同的地形中分布数量也不同 ,丘间地有较多的幼苗 ,背风坡幼苗特别少。油蒿成年个体在人
目的:通过对39例胸腹水和腹腔液标本及12例胃肠癌端粒酶活性的检测,结合脱落细胞学检查,探讨端粒酶活性检测在胸腹水和腹腔液良恶性判别中的临床应用价值。方法:采用PCR-TRAP
为丰富中华民族基因数据库,获取中国吉林省特有少数民族--朝鲜族D3S1358、vWA、FGA、TH01、TPOX、CSF1PO、D5S818、D13S317、D7S820等9个STR基因座的群体遗传数据.采用四色荧
随着城市规模的不断增长，城市规划在管理上有了一定的困难，为了加强城市规划管理的有效性，加强信息技术和地理信息系统的应用是十分重要的。本文就地理信息系统的功能优势、地理
高层建筑是我国建筑行业的流行趋势，这不仅可以有效的缓解我国的土地资源问题，还能加快城市的发展。我国的高层建筑中的土建施工技术整体水平还有待提高，本文对我国的高层建筑中
目的：探讨临床上尖锐湿疣的特点、疗效、及对人体的影响和尖锐湿疣的高复发率的影响因素。方法针对临床上的病例和万方数据库以及维普数据库中有关尖锐湿疣的报道进行回顾性分
二战后经历过经济恢复、高速增长，目前又处于制度改革和结构调整时期的日本经济，既有成功的经验，也有失败。通过对日本市场经济研修考察，可以发现日本的市场经济在某些方面与中国
采用碘量法对毛乌素沙地碱湖的钝顶螺旋藻S1与国外引进的钝顶螺旋藻A2和极大螺旋藻S3的过氧化氢酶(CAT)进行了比较研究.结果表明:S1、S2和S3 CAT活性在25℃、pH 7.0时分别为4
外墙保温系统是通过对各类材料特性的运用，在科学设计以及合理施工的基础上，满足建筑物隔音、节能以及装饰等需求，是现代建筑物外围保护的一种标志性系统。外墙保温施工过程同时
以水稻广亲和品种Cpslo17为材料,构建了一个覆盖9倍核基因组的cosmid文库,其平均插入片段约40 kb.以与广亲和位点紧密联锁的单拷贝分子标记BAC23D12的R末端为探针,从cosmid文