【摘 要】
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目的 从体外观察ERK信号通路在甲状旁腺激素(PTH)致人近曲小管上皮细胞(HK-2)合成纤溶酶原激活物抑制物1(PAI-1)中的作用.方法 以HK-2细胞株为研究对象,用不同浓度PTH(10-8、
【机 构】
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上海交通大学附属第一人民医院肾内科
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目的 从体外观察ERK信号通路在甲状旁腺激素(PTH)致人近曲小管上皮细胞(HK-2)合成纤溶酶原激活物抑制物1(PAI-1)中的作用.方法 以HK-2细胞株为研究对象,用不同浓度PTH(10-8、10-9、10-10、10-11、10-12 mol/L)作用细胞48 h,以及10-10 mol/LPTH 作用细胞不同时间(12、24、36、48、72 h),分别用RT-PCR法检测PAI-1 mRNA表达,Western 印迹法检测PAI-1蛋白表达.以10-10 mol/L PTH作用细胞48 h,分别观察细胞ERK 1/2抑制剂预处理前后磷酸化(p)ERK1/2、PAI-1mRNA及蛋白的变化情况.结果 10-12 mol/L PTH可促进细胞在基因及蛋白水平合成PAI-1,随着PTH浓度逐渐上升,PAI-1 mRNA及蛋白浓度均相应增加,以10-10 mol/L PTH组刺激作用最显著,分别为对照组的4.01倍和3.81倍(均P＜0.01).但随着PTH浓度进一步增加,PAI- 1mRNA及蛋白浓度却随之下降.10-10 mol/L PTH作用细胞,12 h时有少量PAI-1表达,72 h时达峰值,并呈时间依赖性,分别为0h组的4.06倍和4.03倍(均P＜0.01).10-10 mol/L PTH作用细胞48 h,有大量的p-ERK1/2合成(P＜0.01),经ERK 1/2抑制剂预处理后,PAI-1及ERK均显著下降(均P＜0.01),但仍高于对照组(均P＜ 0.05).结论 ERK信号通路部分参与PTH致HK-2细胞合成PAI-1的作用.
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