【摘 要】
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目的克隆肺炎链球菌自溶素（LytA）基因并在大肠埃希菌中表达及蛋白纯化。方法用PCR方法从肺炎链球菌基因组中克隆肺炎链球菌自溶素基因,然后将其插入原核表达载体pET32a（＋）,构建pET
【机 构】
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复旦大学附属眼耳鼻喉科医院耳鼻咽喉科,南昌大学生命科学学院
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目的克隆肺炎链球菌自溶素（LytA）基因并在大肠埃希菌中表达及蛋白纯化。方法用PCR方法从肺炎链球菌基因组中克隆肺炎链球菌自溶素基因,然后将其插入原核表达载体pET32a（＋）,构建pET32a（＋）-LytA重组质粒,经IPTG诱导使该基因在大肠埃希菌BL21（DE3）中表达,亲和层析法纯化目的蛋白,将获得的蛋白用Western blot鉴定。结果扩增出的DNA序列与GenBank中的LytA基因序列一致,成功构建了pET32a（＋）-LytA重组质粒并在大肠埃希菌中高效表达,所表达的蛋白经Wester
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