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目的
优化蛋白制备工艺，减少原核表达包涵体变复性产生的多聚体。
方法根据原始工艺进行菌体培养、破壁以及包涵体收集和变复性。然后在包涵体复性液中直接添加硫酸铵固体(优化工艺)。离心去沉淀，收集上清液制备蛋白粗制品。对原始工艺和优化工艺制备的蛋白粗制品进行凝胶蛋白结合量、蛋白回收率、纯化蛋白量以及细胞杀伤活性比较。
结果与原始工艺相比，增加30%饱和度硫酸铵沉淀步骤的优化工艺可使1 ml层析凝胶的蛋白结合量由1 mg提高至20 mg，单位体积发酵液蛋白回收率由10%增加至90%，400 ml发酵液所得的纯化蛋白量由3 mg提升至15 mg。蛋白粗制品的平均半数抑制浓度从0.077 99 μg/ml降至0.045 69 μg/ml。
结论在包涵体复性液中添加硫酸铵可有效减少多聚体。