【摘 要】
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旨在使用转座子插入突变方法构建牛支原体08M株的突变体文库,为毒力相关基因的鉴定提供技术平台。测定了牛支原体08M株的浓度（颜色变化单位,CCU）和庆大霉素最低抑菌浓度（MIC）。应
【机 构】
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中国农业科学院兰州兽医研究所、家畜疫病病原生物学国家重点试验室
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旨在使用转座子插入突变方法构建牛支原体08M株的突变体文库,为毒力相关基因的鉴定提供技术平台。测定了牛支原体08M株的浓度（颜色变化单位,CCU）和庆大霉素最低抑菌浓度（MIC）。应用电穿孔方法,将庆大霉素抗性质粒p ISM2062（携带有转座子Tn4001mod）导入牛支原体08M株感受态细胞内,经抗性平板筛选、液体培养及PCR鉴定,构建08M株的突变体文库。随机挑选10个克隆菌株传10代检测转座子稳定性,挑选2个克隆用Southern blot检测转座子是否存在多次插入。结果显示：08M株浓度为1.1
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