【摘 要】
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目的:获得人次级淋巴组织趋化因子(SLC)基因,并通过大肠杆菌实现人SLC的非融合表达.方法:提取淋巴结组织总RNA,RT-PCR法扩增人SLC成熟肽基因,克隆到pMD18-T载体中,DNA测序.用
【机 构】
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中国科技大学免疫学研究所,山东省医学科学院基础医学研究所
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目的:获得人次级淋巴组织趋化因子(SLC)基因,并通过大肠杆菌实现人SLC的非融合表达.方法:提取淋巴结组织总RNA,RT-PCR法扩增人SLC成熟肽基因,克隆到pMD18-T载体中,DNA测序.用限制性内切酶切下目的基因,与相应酶切的表达载体pBV220连接、筛选、鉴定.42℃热诱导表达目的蛋白,SDS-PAGE和 Western 印迹法鉴定重组蛋白,分子筛初步纯化目的蛋白.结果:表达蛋白占菌体15%以上,免疫印迹证实为特异性蛋白,分子筛纯化后纯度达90%以上.结论:成功获得人SLC的原核表达.
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