乙型脑炎病毒抗体捕获ELISA检测方法的初步建立

来源 :中华地方病学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:jingcheng0417
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目的 建立检测乙型脑炎病毒抗体的抗体捕获ELISA方法.方法 以乙型脑炎病毒E蛋白抗原表位E39特异的单克隆抗体包被ELISA板,吸附乙型脑炎减毒活疫苗株SA14-14-2病毒粒子,再以吸附的病毒粒子捕获乙型脑炎病毒抗体,建立抗体捕获ELISA方法:同时与以乙型脑炎病毒细胞培养上清包被的间接ELISA方法进行对比,并检测临床血清样品105份.结果 间接ELISA方法背景无法消除,1:10、1:100、1:1000各稀释度的阳性血清与阴性血清吸光度(A)值相近,A阳性血清/阴性血清分别为1.02、0.99、1.13,均<2.1.而抗体捕获ELISA方法1:10、1:100稀释度的A阳性血清/阴性血清分别为3.57、2.94,均>2.1;1:1000稀释度的A阳性血清/阴性血清为1.42,<2.1,表明血清稀释度为1:100时可以显著区别乙型脑炎病毒感染的阳性血清与阴性血清,明显消除间接ELISA方法中背景过高的问题.抗体捕获ELISA方法检测105份临床血清样品,A阳性血清/阴性血清为0.257~0.321(0.262±0.050),均<2.1,为乙型脑炎病毒抗体阴性血清.结论 初步建立了乙型脑炎病毒抗体捕获ELISA方法,该方法特异性较高,对于建立乙型脑炎病毒群的快速鉴别诊断方法具有重要意义。

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