论文部分内容阅读
摘 要：目的：对竹柏叶中挥发油的化学成分进行分析。方法：采用水蒸气蒸馏法提取挥发油，得油率为0.05%，利用GC-MS联用技术对其进行分离分析。结果：竹柏叶中挥发油共分离出18个峰，鉴定出了13个化合物，占总离子流图色谱峰面积的94.11%。结论：竹柏挥发油的主要成分为萜烯类和醇类物质，主要有4-异亚丙烯基-1-乙烯基烯(53.82%)、α-毕澄茄油烯(10.04%)、β-榄香烯(9.577%)、(-)-α-榄香烯(7.102%)、(-)-α-蒎烯(5.591%)、石竹烯(2.235%)。该方法快速、简便，可用于竹柏的质量分析和鉴别。
关键词：竹柏；挥发油；气质联用法；GC-MS
中图分类号：R284.1 文献标识码：A 文章编号：1673-2197(2008)05-051-02
竹柏Podocarpus nagi (Thun.) Zoll et Mor，为罗汉松科竹柏属常绿乔木，别名糖鸡子、罗汉柴、椰树、山杉、铁甲树等，属裸子植物类。广泛分布于广东、浙江、福建、广西等地[1]。竹柏在我国南方有大量栽培，但多作为观赏的园庭、园林树种，在医药上的研究应用并不多见。竹柏具有净化空气、驱蚊虫、抗污染和治疗肿瘤的功效，其主要成分有挥发油、萜类成分和黄酮类成分等[1，2，3]，挥发油为竹柏叶发挥药效作用的主要部位，但目前对其研究报道仍然较少。本实验采用水蒸汽蒸馏法提取挥发油，利用气质联用技术对竹柏的挥发油进行了分析研究，发现其挥发油中所含主要成分与文献报道[3]存在差异，现报道如下。
1 仪器与材料
(1)仪器，试剂：气相色谱-质谱联用仪(Agilent 6890N-5793 N)，乙醚、无水硫酸钠等试剂(AR)。
(2)材料：竹柏叶采集于广东省广州市，原植物经蔡岳文副主任中药师鉴定为罗汉松科竹柏Podocarpus nagi (Thun.) Zoll et Mor。将其新鲜叶片切碎，水蒸气蒸馏法提取并用无水硫酸钠干燥获得淡黄色挥发油，气味清香，得油率为0.05%。
2 实验和分析
(1)供试品溶液的制备：精密量取挥发油适量，加乙醚稀释10倍，再加适量无水硫酸钠进行脱水，滤过，备用。
(2)空白溶液的制备：不加样品，按供试品溶液制备方法制成空白溶液，加适量无水硫酸钠进行脱水，备用。
(3)GC-MS总离子流的建立。
HP-5MS Capilary 30.0m×250μm×0.25μm(Agilent)；进样口温度250℃，接口温度280℃；载气为氦气，流速1.0mL/min；采用分流进样，分流比30∶1，进样量1.0μL；升温程序：开始60℃保持2min，再以15℃min的速度升至150℃，再以6℃min的速度升至250℃，POST在280℃保持3min，可达到较好分离效果。峰面积归一法计算各化合物的相对含量。
(4)MS-DS分析。
MS：EI源(70ev)，双灯丝；扫描范围40~400m/z，扫描间歇1.0second。标准谱库为美国NIST谱库。
3 结果与讨论
用GC-MS联用仪计算机对总离子流色谱图进行分析和处理，根据相应的MS谱图，用NIST谱库系统检索，并参考有关文献和手册[4]，确定化学组分，并使用峰面积归一法计算各组分的相对含量。共鉴定出13种化学成分。竹柏叶挥发油的总离子流图见图1，以面积归一化法计算各组分的相对含量见表1。
各个化学组分在所选择分析条件下有较好的分离效果，已鉴定化合物占总离子流出峰面积的94.11%。竹柏叶挥发油的主要成分为萜烯类成分，主要有(-)-α-蒎烯、β-榄香烯(、(-)-α-榄香烯、石竹烯、α-毕澄茄油烯、4-异亚丙烯基-1-乙烯基烯、顺-2-己烯-1-醇、杜松-1(10)，4-二烯、杜松-1，4-二烯、3，7，7-三甲基二环[4，1，0]庚-3-烯。其中β-榄香烯是抗肿瘤有效成分，具有很强杀灭肿瘤细胞及抑制肿瘤生长作用，其乳剂是临床应用与治疗肿瘤的二类新药[5]，还有(-)-α-榄香烯、石竹烯、(-)-α-蒎烯等都是具有较高药用价值的天然产物。
图1 竹柏叶挥发油的总离子流
由表1中成分相对面积含量可知，竹柏叶中所含主要成分由大到小依次为4-异亚丙烯基-1-乙烯基烯(53.82%)、α-毕澄茄油烯(10.04%)、β-榄香烯(9.577%)、(-)-α-榄香烯(7.102%)、(-)-α-蒎烯(5.591%)、石竹烯(2.235%)。有文献[3]报道主要含有ν-榄香烯(25.89%)、β-荜澄茄烯(12.34%)β-古芸香烯(9.67%)等存在明显差异，而与文献[2]中报道的分析结果较为接近。
4 结论
用水蒸气蒸馏法提取竹柏叶片中的挥发油，得油率为0.05%，采用GC-MS方法从该挥发油中分离鉴定出13个化合物，主要有4-异亚丙烯基-1-乙烯基烯(53.82%)、α-毕澄茄油烯(10.04%)、β-榄香烯(9.577%)、(-)-α-榄香烯(7.102%)、(-)-α-蒎烯(5.591%)、石竹烯(2.235%)。本研究通过对竹柏叶挥发油成分和含量的分析评价，可为其进一步合理开发与综合利用提供研究基础。
参考文献：
[1] 孙同兴，王雪英.竹柏属植物的分类、地理分布及药用价值[J].亚热带植物科学，2005，34(2)：53.
[2] 何道航，庞义，任三香.长叶竹柏挥发油的化学成分研究[J].林产化学与工业，2005，25(2)：119~121.
[3] 吴惠勤，王艇，苏应娟，等.竹柏叶精油化学成分的研究[J].武汉植物学研究，1996，14(3)：287~288.
[4] 施钧慧，汪聪慧.香料质谱图集[M].北京：中国质谱学会，1992.
[5] 顾洪丰，瞿延晖.β-榄香烯抗肿瘤机理研究进展[J].湖南医学院学报，2002，22(4)：64.
(责任编辑：万贤贤)
关键词：竹柏；挥发油；气质联用法；GC-MS
中图分类号：R284.1 文献标识码：A 文章编号：1673-2197(2008)05-051-02
竹柏Podocarpus nagi (Thun.) Zoll et Mor，为罗汉松科竹柏属常绿乔木，别名糖鸡子、罗汉柴、椰树、山杉、铁甲树等，属裸子植物类。广泛分布于广东、浙江、福建、广西等地[1]。竹柏在我国南方有大量栽培，但多作为观赏的园庭、园林树种，在医药上的研究应用并不多见。竹柏具有净化空气、驱蚊虫、抗污染和治疗肿瘤的功效，其主要成分有挥发油、萜类成分和黄酮类成分等[1，2，3]，挥发油为竹柏叶发挥药效作用的主要部位，但目前对其研究报道仍然较少。本实验采用水蒸汽蒸馏法提取挥发油，利用气质联用技术对竹柏的挥发油进行了分析研究，发现其挥发油中所含主要成分与文献报道[3]存在差异，现报道如下。
1 仪器与材料
(1)仪器，试剂：气相色谱-质谱联用仪(Agilent 6890N-5793 N)，乙醚、无水硫酸钠等试剂(AR)。
(2)材料：竹柏叶采集于广东省广州市，原植物经蔡岳文副主任中药师鉴定为罗汉松科竹柏Podocarpus nagi (Thun.) Zoll et Mor。将其新鲜叶片切碎，水蒸气蒸馏法提取并用无水硫酸钠干燥获得淡黄色挥发油，气味清香，得油率为0.05%。
2 实验和分析
(1)供试品溶液的制备：精密量取挥发油适量，加乙醚稀释10倍，再加适量无水硫酸钠进行脱水，滤过，备用。
(2)空白溶液的制备：不加样品，按供试品溶液制备方法制成空白溶液，加适量无水硫酸钠进行脱水，备用。
(3)GC-MS总离子流的建立。
HP-5MS Capilary 30.0m×250μm×0.25μm(Agilent)；进样口温度250℃，接口温度280℃；载气为氦气，流速1.0mL/min；采用分流进样，分流比30∶1，进样量1.0μL；升温程序：开始60℃保持2min，再以15℃min的速度升至150℃，再以6℃min的速度升至250℃，POST在280℃保持3min，可达到较好分离效果。峰面积归一法计算各化合物的相对含量。
(4)MS-DS分析。
MS：EI源(70ev)，双灯丝；扫描范围40~400m/z，扫描间歇1.0second。标准谱库为美国NIST谱库。
3 结果与讨论
用GC-MS联用仪计算机对总离子流色谱图进行分析和处理，根据相应的MS谱图，用NIST谱库系统检索，并参考有关文献和手册[4]，确定化学组分，并使用峰面积归一法计算各组分的相对含量。共鉴定出13种化学成分。竹柏叶挥发油的总离子流图见图1，以面积归一化法计算各组分的相对含量见表1。
各个化学组分在所选择分析条件下有较好的分离效果，已鉴定化合物占总离子流出峰面积的94.11%。竹柏叶挥发油的主要成分为萜烯类成分，主要有(-)-α-蒎烯、β-榄香烯(、(-)-α-榄香烯、石竹烯、α-毕澄茄油烯、4-异亚丙烯基-1-乙烯基烯、顺-2-己烯-1-醇、杜松-1(10)，4-二烯、杜松-1，4-二烯、3，7，7-三甲基二环[4，1，0]庚-3-烯。其中β-榄香烯是抗肿瘤有效成分，具有很强杀灭肿瘤细胞及抑制肿瘤生长作用，其乳剂是临床应用与治疗肿瘤的二类新药[5]，还有(-)-α-榄香烯、石竹烯、(-)-α-蒎烯等都是具有较高药用价值的天然产物。
图1 竹柏叶挥发油的总离子流
由表1中成分相对面积含量可知，竹柏叶中所含主要成分由大到小依次为4-异亚丙烯基-1-乙烯基烯(53.82%)、α-毕澄茄油烯(10.04%)、β-榄香烯(9.577%)、(-)-α-榄香烯(7.102%)、(-)-α-蒎烯(5.591%)、石竹烯(2.235%)。有文献[3]报道主要含有ν-榄香烯(25.89%)、β-荜澄茄烯(12.34%)β-古芸香烯(9.67%)等存在明显差异，而与文献[2]中报道的分析结果较为接近。
4 结论
用水蒸气蒸馏法提取竹柏叶片中的挥发油，得油率为0.05%，采用GC-MS方法从该挥发油中分离鉴定出13个化合物，主要有4-异亚丙烯基-1-乙烯基烯(53.82%)、α-毕澄茄油烯(10.04%)、β-榄香烯(9.577%)、(-)-α-榄香烯(7.102%)、(-)-α-蒎烯(5.591%)、石竹烯(2.235%)。本研究通过对竹柏叶挥发油成分和含量的分析评价，可为其进一步合理开发与综合利用提供研究基础。
参考文献：
[1] 孙同兴，王雪英.竹柏属植物的分类、地理分布及药用价值[J].亚热带植物科学，2005，34(2)：53.
[2] 何道航，庞义，任三香.长叶竹柏挥发油的化学成分研究[J].林产化学与工业，2005，25(2)：119~121.
[3] 吴惠勤，王艇，苏应娟，等.竹柏叶精油化学成分的研究[J].武汉植物学研究，1996，14(3)：287~288.
[4] 施钧慧，汪聪慧.香料质谱图集[M].北京：中国质谱学会，1992.
[5] 顾洪丰，瞿延晖.β-榄香烯抗肿瘤机理研究进展[J].湖南医学院学报，2002，22(4)：64.
(责任编辑：万贤贤)