环介导等温扩增技术的引物设计与筛选研究

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[目的]研究引物设计与非特异扩增之间的关系。[方法]以单核细胞增生李斯特菌(Listeria monocytogenes)的特异性基因hlyA与沙门氏菌(Salmonella)的特异基因invA为例设计引物,进行环介导等温扩增。[结果]就环介导等温扩增的任何2条引物而言,如果2条引物3’端的3~4碱基在同一条引物上都有2个互补序列,在常用的LAMP反应体系与反应条件下,必然有非特异性扩增,LAMP引物设计与筛选应避免这种情况出现。[结论]按照该试验的原则设计引物,可降低非特异性扩增。
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