【摘 要】
：
为了获得非洲猪瘟病毒（African swine fever virus, ASFV）体外诱导表达的MGF360-13L蛋白，试验依据GenBank中报道的MGF360-13L基因序列设计引物，引入His标签，以ASFV全序列为模板扩增目的片段。将目的基因克隆到原核表达载体pGEX-6p-1上，转化BL21（DE3）大肠杆菌感受态细胞中进行体外诱导表达，聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）分析蛋
【基金项目】
：
军事医学专项课题横向委托项目“非洲猪瘟血清学监测技术研究”（2019Y03013）； 吉林省农业科技创新工程项目“非洲猪瘟诊断试剂的研制”“动物疫病诊断技术创新和应用”（CXGC2021TD008;CXGC2021ZY033）；
论文部分内容阅读
为了获得非洲猪瘟病毒（African swine fever virus, ASFV）体外诱导表达的MGF360-13L蛋白，试验依据GenBank中报道的MGF360-13L基因序列设计引物，引入His标签，以ASFV全序列为模板扩增目的片段。将目的基因克隆到原核表达载体pGEX-6p-1上，转化BL21（DE3）大肠杆菌感受态细胞中进行体外诱导表达，聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）分析蛋白质的表达情况，将表达的重组蛋白通过镍琼脂糖凝胶柱亲和层析纯化，蛋白质印迹（Western-blot）分析蛋白质的活性。结果表明：克隆得到的MGF360-13L基因片段长度为1 060 bp,获得的重组蛋白在沉淀中以包涵体的形式表达，分子质量约为60 ku,纯化后可获得纯度较高的MGF360-13L,用BCA法测定最高浓度为2.73 mg/mL。Western-blot检测结果显示在60 ku处有一条明显的特异性条带说明MGF360-13L蛋白可以在BL21（DE3）大肠杆菌感受态细胞中表达并纯化，纯化后可获得纯度较高的MGF360-13L,且具有良好的反应原性。
其他文献
欧盟是全球最早开展碳治理的地区，在应对气候变化领域长期处于领先地位。通过对欧盟碳治理的发展进行系统梳理，本研究认为，欧盟在碳治理方面取得的成就主要得益于欧盟在碳减排问题上始终重视发挥政府与市场的减排作用，对内制定统一的应对气候变化相关政策，对外积极推动应对气候变化国际合作。但是，受经济发展疲软、政治架构复杂、奉行气候单边主义等因素影响，近年来欧盟在应对气候变化领域的领导力持续下降。当前中国正处于推
随着对湿地重要性认知的提高，我国对湿地生态修复技术的需求也日益增加，其中近自然湿地生态修复倍受关注。描述了近自然概念的由来，提出了近自然湿地的定义并辨析了其与人工湿地的主要区别。以太湖竺山湖湿地生态修复为例，介绍了近自然湿地生态修复的设计思路、主要技术措施和修复效果。在竺山湖近自然湿地生态修复中，依次实施了水文水动力改善、基底形态营造、植物恢复、水生动物恢复、生物量管理等措施，即设计了湿地高程、水
基于全球制药装备专利整体态势,以中药制药装备为特色,针对中药制药关键技术领域炮制、制丸、干燥相关设备进行深入分析;并利用社会网络分析法,研究制药装备核心技术领域及其发展趋势。分析结果显示,全球制药装备产业已进入技术快速发展期;炮制设备技术及市场高度集中于中国,但国内最具中药特色的炮炙设备技术创新十分薄弱;天士力公司是滴丸设备最重要的技术创新主体,其以"滴丸的振动滴制"工艺改进为突破点,带动了滴丸设
黄芪建中汤由黄芪等7种单味药材组成。本文主要对黄芪建中汤中单味药材化学成分进行简单综述，并对其临床药理作用进行介绍，为黄芪建中汤的药效物质基础和作用机制研究提供参考。
自20世纪50年代以来,在以服务国家战略需求为导向的大规模、长时期、持续的自然资源综合考察活动推动下,中国自然资源研究形成了跨部门、跨学科、跨地区的综合集成的发展特色,并且在"任务带学科"的发展过程中也逐步创建了较为系统的资源科学理论基础和实证方法论体系。面对自然资源部成立以来国家对自然资源综合管理体制深化改革的重大需求,推动建立并完善独立的资源科学学科体系,已成为当前我国自然资源研究领域的重要任
经过多年检察实践的推动,我国检察案例指导制度建设出现了一些积极向上的景象,但也存在一些不容忽视的问题。解决这些问题的出路是正确认识检察案例指导制度建设的内容、适用边界,正确把握检查案例指导制度建设中应坚持的基本原则和应处理好的几个关系,掌握好检察案例指导制度建设中的几个具体问题,积极稳妥地推进检察案例指导制度规范化建设,从而把我国检察案例指导制度标准化建设不断向前推进,促进我国检察案例指导制度健康
为了培养创新创业人才，文章对工匠精神体现的职业精神进行分析，探讨了工匠精神对大学生创新创业人才培养的重要性和存在的问题，提出了培养措施：立足工匠精神，实施顶层设计；基于工匠精神，明确创业创新方向；利用工匠精神，为学生的创新创业提供驱动力；加强宣传，创设有益于落实工匠精神的社会环境；以工匠精神为思想，为就业创业提供实践理论；依据工匠精神，培养学生的合作能力。
优质医疗资源扩容是国家区域协同发展和公共服务均等化的重大战略要求。为实现医疗资源扩容，中央全面深化改革委员会提出建设区域医疗中心这一创新性制度安排；《中华人民共和国国民经济和社会发展第十四个五年规划和2035年远景目标纲要》再次提出“加快建设区域医疗中心”。在现阶段，区域医疗中心试点是否得到有效推进是改革亟需关注的问题。本文基于行动者中心制度主义，以行为主义分析为起点构建优质医疗资源扩容改革主体行
近年来，桃树产业已成为各地增收致富的特色产业，给桃树种植户带来了较高的经济效益。随着桃树种植面积的不断扩大，各地重视程度不同，有些管理疏忽，使得桃树各种病虫害时有发生。缩叶病是桃树种植过程中常见的真菌病害，在各地桃树种植区域都可发病。桃树缩叶病主要危害桃树的枝叶，叶片病害后肿胀起皱，严重影响叶片的光合作用，导致桃树当年种植收入减少，还会影响明年桃树的生长，降低桃子的质量和产量，严重者导致桃树枯萎。