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目的 建立稳定高表达Uroplakin II(UPII)基因的人膀胱癌细胞株.方法采用分子克隆技术构建含全长UPII结构基因的真核表达载体,进行酶切鉴定、核酸序列分析,并将其在阳离子脂质体Lipofectamine 2000的介导下转染UPII基因缺陷型膀胱移行细胞癌(TCC)细胞株EJ,经G 418 筛选获得抗性亚克隆细胞株;逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、Western blotting方法对亚克隆细胞株进行UPII基因表达鉴定.结果所获UPII基因真核表达载体pcDNA3-UPII转染EJ细胞后,通过G 418 持续压力筛选4周获得亚克隆细胞株EJ/UPII;RT-PCR、Western blotting均未检测到EJ细胞的UPII基因表达,而EJ/UPII细胞中UPII mRNA和蛋白表达水平显著增高 (P< 0.01). 结论通过基因转染方法建立了稳定高表达UPII基因的膀胱TCC细胞株,为进一步探讨UPII基因在膀胱TCC生物学行为中的作用及其靶向生物治疗策略奠定了基础。