【摘 要】
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目的 建立同时测定人尿液样本中氢化可的松和6β-羟基氢化可的松浓度的LC-MS/MS方法.方法 分别以d4-氢化可的松和d4-6β-羟基氢化可的松为内标,尿液样本加入含内标的甲醇处理
【机 构】
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南京医科大学第一附属医院临床药理研究室,南京,210029;东部战区总医院药学部,南京,211166
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目的 建立同时测定人尿液样本中氢化可的松和6β-羟基氢化可的松浓度的LC-MS/MS方法.方法 分别以d4-氢化可的松和d4-6β-羟基氢化可的松为内标,尿液样本加入含内标的甲醇处理后分析.色谱柱为Waters CORTECS?C18+柱(2.1 mm×50 mm,2.7μm),流动相为甲醇-0.1％甲酸水溶液,梯度洗脱,流速为0.6 mL·min-1.质谱条件采用电喷雾正离子源,扫描方式为多重反应监测,用于定量分析的检测离子分别为m/z 363.2→121.1(氢化可的松)、m/z 367.2→121.1(d4-氢化可的松)、m/z 379.2→325.2(6β-羟基氢化可的松)、m/z 383.2→328.2(d4-6β-羟基氢化可的松).结果 氢化可的松及6β-羟基氢化可的松在1.00～300 ng·mL-1和5.00～1500 ng·mL-1内线性良好,定量下限分别为1.00 ng·mL-1和5.00 ng·mL-1,批内和批间精密度均<15％,准确度在-6.9％～5.7％范围内,基质效应为95.6％～106.0％,提取回收率为97.2％～108.3％.尿液样本室温放置10 h、反复冻融3次及-80℃冰冻4个月稳定性良好,待测溶液进样器放置24 h稳定.结论 该研究建立的分析方法灵敏、准确,样本前处理简便、快捷,可用于人尿液样本中氢化可的松和6β-羟基氢化可的松浓度的测定,为人体CYP3A4活性的评价提供可靠的检测方法.
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