【摘 要】
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目的 研究纤维母细胞生长因子(fibroblast growth factor,bFGF)对肾脏足细胞增殖、骨形态蛋白-7(bone morphogenetic protein-7,BMP-7)以及细胞骨架蛋白表达的调节作用.方法
【机 构】
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北京人学第三医院肾内科,北京,100083;清华人学第附属医院中心实验室,北京,100016
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目的 研究纤维母细胞生长因子(fibroblast growth factor,bFGF)对肾脏足细胞增殖、骨形态蛋白-7(bone morphogenetic protein-7,BMP-7)以及细胞骨架蛋白表达的调节作用.方法 利用SV40肿瘤抗原转染所获得的永牛性小鼠足细胞系培养,以集落形成法和噻唑蓝MTT还原实验测定不同浓度bFGF刺激下的足细胞增殖,采用8DS-聚内烯酰胺凝胶电泳和Western blotting检测BMP-7、alpha-平滑肌肌动蛋白(a-SMA)、以及波形蛋白(vimentin)的蛋白质水平表达,同时以甲基兰染色观察细胞形态.结果 bFGF(1.25～20 ng/ml)处理10天后明显增加足细胞集落生长,并呈现浓度依赖关系(r=0.844),当bFGF达到20ng/ml时,集落数为对照培养的4.2倍,MTT实验办获得一致的结果 .甲基兰染色发现,bFGF刺激后的集落生长更加致密,直径增大,但同时出现集落形成细胞的空泡样改变.Western blotting免疫印迹法检测剑,bFGF(1.25～20ng/m1)处理96h后能显著抑制BMP-7的表达并呈浓度依赖关系,20ng/ml bFGF抑制>90%.96h bFGF处理也抑制a-SMA表达,但对vimentin表达无叫显作用.结论 以上结果 表明bFGF刺激足细胞增殖的同时,对BMP 7的表达呈现下调作用,并引起空泡形成及a-SMA减少等细胞内部结构改变.基丁BMP-7的肾保护作用,其降低可能是介导bFGF引起肾损伤的重耍机制.
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