毒害艾美球虫孢子化卵囊cDNA文库的构建

来源 :中国兽医科学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:ASGSXX1
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为构建毒害艾美球虫孢子化卵囊cDNA表达文库,用Trizol试剂提取毒害艾美球虫孢子化卵囊总RNA,采用SMART技术,在逆转录酶的作用下将总RNA反转录成第一链cDNA,经LD-PCR扩增合成双链cDNA(ds cDNA)。经蛋白酶K消化、SfiⅠ酶切,过CHROMA SPIN-400^TM柱去除小于400bp的片段,与λTriplEx2^TM噬菌体载体连接,用GigapackⅢGold^TM载体蛋白包装,构建了cDNA噬菌体表达文库。经测定,原始文库容量为4.72×10^6pfu/mL,扩增
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