【摘 要】
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描述了一种利用特殊的双链引物--突触引物,用于核酸扩增的特异定量检测.在传统的引物的5'端标记荧光物质,而在引物的互补序列的3'端标记荧光淬灭剂以封闭其延伸.二者
【机 构】
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厦门大学生命科学学院,厦门大学生命科学学院
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描述了一种利用特殊的双链引物--突触引物,用于核酸扩增的特异定量检测.在传统的引物的5'端标记荧光物质,而在引物的互补序列的3'端标记荧光淬灭剂以封闭其延伸.二者杂交即成双链突触引物.在制备PCR反应混合物阶段以及加热的初期,突触引物保持稳定的双链结构而不能引导扩增,在退火阶段,突触引物部分解链导致引物延伸,荧光物质与淬灭剂分开而产生荧光.利用人β珠蛋白基因对此方法进行了验证.这种可自行退火的荧光引物不仅简单地实现了实时扩增,同时比常规的热启动PCR更有效地提高了扩增的特异性.
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