【摘 要】
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建立纯化（mAb）F（ah’）2片段的有效方法．方法：在pH5．5环境下，用DTT激活木瓜酶，在没有DTT存在下消化抗人肝癌mAbHAb18IgG1，37℃，反应8h，然后分别用SephacrylS-200（1cm×65cm）凝胶过滤柱和DEAE
【机 构】
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第四军医大学基础部病理学教研室肝癌导向药物课题组
【基金项目】
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国家863课题!863－102－12（1）
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建立纯化（mAb）F（ah’）2片段的有效方法．方法：在pH5．5环境下，用DTT激活木瓜酶，在没有DTT存在下消化抗人肝癌mAbHAb18IgG1，37℃，反应8h，然后分别用SephacrylS-200（1cm×65cm）凝胶过滤柱和DEAE-Sepharose-FF（2cm×18cm）阴离子交换柱纯化．结果：经SDS-PAGE（100g／L）电泳测定，2种方法纯化的F（ah’）2片段的纯度分别为81％和94．6％，纯化周期为2h和50min，得率为49％和53％，经间接免疫荧光法测定F（ab’）2片段的免疫活性均为1∶12000，比消化前IgG的1∶16000略有损失．结论；DEAE-Sehparose-FF阴离子交换一步法是在FPLC上建立的较SephacrylS-200凝胶过滤法更为有效的F（ab’）2片段纯化方法，该方法在F（ah’）2片段的纯度、活性、产率方面均优于文献报道．
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