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利用PCR定点突变技术,以野生型大肠杆菌二氢叶酸还原酶基因为模板,获取3种突变型(Cys85Ser,Cys151Ser,Cys85/151Ser)二氢叶酸还原酶(DHFR)基因.用限制性内切酶BamHⅠ与PstⅠ将3种突变基因片段插入到克隆载体pUC18上,进行蓝白筛选,将筛选的克隆进行DNA序列测定.