Arresten在烟草中的表达及其生物学活性分析

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采用5’端引入His—tag的引物从携带有Arresten基因的质粒pCA中扩增血管生成抑制因子Arresten编码基因。构建其植物表达载体pCAMBIAarr并通过冻融法转化根癌农杆菌LBA4404,获得携带目的基因的重组农杆菌。采用叶盘法以重组农杆菌转化烟草,在50μg/mL潮霉素B为选择压力下获得再生烟草植株,经过Southern杂交、RT-PCR和Western blotting检测,获得稳定整合有Arresten编码基因的烟草转基因植株。牛血管内皮细胞BCE增殖抑制实验表明.采用镍离子螯合次氨基
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