人瘦素基因的克隆及在酿酒酵母中的表达和生物信息学分析

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目的构建人瘦素基因和蛋白转导肽Tat基因的融合表达载体,转入酿酒酵母表达系统进行诱导表达,并对融合瘦素蛋白进行生物信息学分析。方法脂肪组织中提取总RNA,逆转录为cDNA,以此cDNA为模板扩增瘦素基因,构建重组质粒pYES2-Tat-leptin,转入酿酒酵母表达菌株INVSc1诱导表达Tat-leptin融合蛋白,利用相关在线软件对融合瘦素蛋白相关的生物学功能进行分析。结果经SDS-PAGE电泳和Western blotting鉴定,酿酒酵母成功表达融合蛋白Tat-leptin。经生物信息学分析后获得了融合瘦素蛋白的相关生物学特性。结论 Tat-leptin融合蛋白在酿酒酵母中成功表达,并对融合瘦素蛋白的生物学特征进行了预测,为消化道基因治疗肥胖的研究奠定了基础。
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