【摘 要】
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目的制备人视黄醇结合蛋白4（RBP4）分子RNAi载体,检测其干涉人肝细胞系LO2中RBP4的表达后对ERK1/2表达及磷酸化和葡萄糖摄取的影响。方法分别构建针对RBP4基因表达框5＇端和3＇端的
【机 构】
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安徽医科大学生物化学教研室,安徽医科大学妇幼保健临床学院产科
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目的制备人视黄醇结合蛋白4（RBP4）分子RNAi载体,检测其干涉人肝细胞系LO2中RBP4的表达后对ERK1/2表达及磷酸化和葡萄糖摄取的影响。方法分别构建针对RBP4基因表达框5＇端和3＇端的干涉载体及真核表达载体,经测序和酶切鉴定后将载体转染LO2,RT-PCR和Western blot法确定其干涉RBP4表达的效率,选择干涉较高的载体用于后续实验;Western blot检测ERK1/2的表达及磷酸化水平的改变,葡萄糖氧化酶法检测上清液中葡萄糖的残留量。结果构建的真核表达载体和干涉载体经酶切、测序
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