【摘 要】
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【目的】探讨脾虚证中线粒体能量代谢障碍机制及健脾益气方药的干预作用。【方法】采用皮下注射利血平法构建脾虚大鼠模型，将造模成功后的大鼠分为脾虚模型组和四君子汤组，每组各7只，另取正常组7只。四君子汤组给予四君子汤1.0 g·mL-1·kg-1灌胃，脾虚模型组和正常组灌胃等体积生理盐水，每日1次，持续21 d。给药期间记录大鼠一般情况。给药结束后，采用对溴苯胺法测定尿D-木糖排泄率，采用苏木素-伊红（
【机 构】
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广州中医药大学科技创新中心广州中医药大学脾胃研究所
【基金项目】
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国家自然科学基金资助项目（编号：81473568）； 中医内科学特色重点学科建设项目经费资助（编号：[2010]356）； 广州中医药大学薪火计划资助项目（编号：XH20160106）；
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【目的】探讨脾虚证中线粒体能量代谢障碍机制及健脾益气方药的干预作用。【方法】采用皮下注射利血平法构建脾虚大鼠模型，将造模成功后的大鼠分为脾虚模型组和四君子汤组，每组各7只，另取正常组7只。四君子汤组给予四君子汤1.0 g·mL-1·kg-1灌胃，脾虚模型组和正常组灌胃等体积生理盐水，每日1次，持续21 d。给药期间记录大鼠一般情况。给药结束后，采用对溴苯胺法测定尿D-木糖排泄率，采用苏木素-伊红（HE）染色法观察骨骼肌病理改变，采用聚合酶链反应（PCR）法检测大鼠骨骼肌细胞色素c氧化酶（COX）Ⅰ、COXⅣmRNA表达，采用免疫组织化学法、蛋白免疫印迹法检测大鼠骨骼肌COXⅠ、COXⅣ蛋白表达。【结果】与正常组比较，脾虚模型组大鼠骨骼肌肌纤维排列紊乱、间隙增大，细胞核分布不均，胞质染色不匀；与脾虚模型组比较，四君子汤组骨骼肌纤维排列较整齐。脾虚模型组大鼠骨骼肌COXⅠ、COXⅣmRNA和蛋白表达水平较正常组降低（P<0.05或P<0.01）；四君子汤组大鼠骨骼肌COXⅠ、COXⅣmRNA和蛋白表达水平较脾虚模型组升高（P<0.05或P<0.01）。【结论】脾虚大鼠存在骨骼肌病理形态损伤，骨骼肌COXⅠ、COXⅣmRNA和蛋白表达均降低。四君子汤改善脾虚大鼠骨骼肌病理结构，提高COXⅠ、COXⅣm RNA和蛋白表达可能是其修复脾虚证能量代谢障碍的机制之一。
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