【摘 要】
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目的:研究羟基积雪草苷对佐剂关节炎大鼠滑膜成纤维细胞活化的影响。方法:将完全弗氏佐剂于大鼠右后足趾皮内注射0.1 mL致炎,建立佐剂关节炎大鼠模型,造模30 d后脱臼处死,取
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目的:研究羟基积雪草苷对佐剂关节炎大鼠滑膜成纤维细胞活化的影响。方法:将完全弗氏佐剂于大鼠右后足趾皮内注射0.1 mL致炎,建立佐剂关节炎大鼠模型,造模30 d后脱臼处死,取出关节处的滑膜,培养原代大鼠滑膜成纤维细胞(FLS),第3~6代细胞用于体外细胞实验。将对数生长期FLS以105个/mL接种于96孔板,利用白介素1β(IL-1β)诱导白介素-6(IL-6)的表达,羟基积雪草苷(终浓度1,5,10,20μmol·L-1)和IL-1β(终浓度10μg·L-1)作用24 h后收集上清。酶联免疫吸附试验(ELISA)检测上清中炎症因子IL-6的水平;实时定量PCR(Real time PCR)检测IL-6 mRNA的表达;蛋白印记法检细胞丝裂原激活的蛋白激酶(MAPK)、蛋白激酶C(PKC)、反应元件结合蛋白(CREB)的表达。结果:与正常组比较,模型组(IL-1β组)IL-6水平和IL-6 mRNA的表达明显升高。羟基积雪草苷预孵24 h后,浓度依赖性抑制IL-6的分泌并下调IL-6mRNA的表达。模型组中细胞外信号调节激酶(ERK)、p38及PKC的磷酸化水平显著提高,羟基积雪草苷逆转了IL-1β诱导的ERK、p38及PKC的磷酸化;同时抑制IL-1β引起的CREB磷酸化。结论:羟基积雪草苷抑制佐剂关节炎大鼠滑膜成纤维细胞活化,其机制可能与抑制MAPK和PKC通路活化,降低CREB的磷酸化有关。
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