【摘 要】
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旨在研究miR-128-1-5p对绵羊前体脂肪细胞增殖与分化的调节作用.本研究经理论预测和试验研究验证miR-128-1-5p的靶基因;过表达miR-128-1-5p后,用qPCR检测增殖标志基因的表达,
【机 构】
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山西农业大学动物科技学院,太谷,030801
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旨在研究miR-128-1-5p对绵羊前体脂肪细胞增殖与分化的调节作用.本研究经理论预测和试验研究验证miR-128-1-5p的靶基因;过表达miR-128-1-5p后,用qPCR检测增殖标志基因的表达,CCK-8和EdU检测细胞增殖情况;用qPCR和Western blotting检测miR-128-1-5p和其靶基因在前体脂肪细胞分化中的表达趋势;通过过表达或抑制miR-128-1-5p研究其对绵羊前体脂肪细胞分化的调节机制;用油红O染色检测成脂能力.结果 表明,KLF2是miR-128-1-5p的靶基因.前体脂肪细胞增殖过程中,过表达miR-128-1-5p后,增殖标志基因的表达量显著或极显著降低(P＜0.05或P＜0.01),细胞活力显著或极显著降低(P＜0.05或P＜0.01),新生细胞数显著减少(P＜0.05).前体脂肪细胞分化过程中,miR-128-1-5p与KLF2的表达呈负相关;过表达miR-128-1-5p极显著下调了KLF2 mRNA的表达量(P＜0.01),显著下调了KLF2蛋白的表达量(P＜0.05),显著或极显著上调了分化标志基因mRNA的表达(P＜0.05或P＜0.01),产生更多脂滴;抑制miR-128-1-5p则结果相反.综上所述,miR-128-1-5p与KLF2存在结合位点.miR-128-1-5p抑制绵羊前体脂肪细胞的增殖,在分化过程中通过靶向抑制KLF2的表达,促进前体脂肪细胞分化和脂滴沉积.
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