【摘 要】
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目的:构建含EGFP标签的人程序性死亡受体(hPD-1)的真核表达载体,为后续基因转移实验奠定基础。方法:PCR扩增hPD-1基因编码框,将PD-1和pEGFP-N1质粒双酶切后进行连接转化,构建
【基金项目】
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上海科技大学生命科学与技术学院本科生实验室运行经费2018A0202-405-07
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目的:构建含EGFP标签的人程序性死亡受体(hPD-1)的真核表达载体,为后续基因转移实验奠定基础。方法:PCR扩增hPD-1基因编码框,将PD-1和pEGFP-N1质粒双酶切后进行连接转化,构建重组载体pEGFP-N1-PD-1,酶切重组质粒并测序鉴定,将构建好的重组质粒转染HEK293T细胞,并提取蛋白进行Western blot检测。结果:重组真核表达载体pEGFP-N1-PD-1经限制性内切酶分析,双酶切之后的条带与理论值相符,测序结果未见碱基变异,提取转染后细胞的总蛋白进行Western blo
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