【摘 要】
：
目的:构建野生型及突变型人IL-13(hIL-13)哺乳细胞表达质粒.方法:采用融合PCR扩增人生长激素(hGH)-hIL13融合蛋白编码序列.PCR产物和pcDNA3.1表达载体经Hind Ⅲ和EcoR Ⅰ双酶
【机 构】
：
上海交通大学医学院附属新华医院儿童呼吸科
【基金项目】
：
国家自然科学基金;上海市科学技术委员会科研计划项目资助
论文部分内容阅读
目的:构建野生型及突变型人IL-13(hIL-13)哺乳细胞表达质粒.方法:采用融合PCR扩增人生长激素(hGH)-hIL13融合蛋白编码序列.PCR产物和pcDNA3.1表达载体经Hind Ⅲ和EcoR Ⅰ双酶切处理后,将PCR产物定向插入pcDNA3.1真核表达载体中,构建质粒pcDNA3.1(+)/hGH-hIL13-a和pcDNA3.1(+)/hGH-hIL13-g.将其转化到DH5α感受态细胞内进行扩增,阳性克隆鉴定,质粒抽提,进行测序验证.结果:重组质粒pcDNA3.1(+)/hGH-hIL13-a和pcDNA3.1(+)/hGH-hIL13-g经测序验证,hGH-hIL13融合蛋白编码序列与实验设计一致,且已与pcDNA3.1(+)真核表达载体正确重组.结论:成功构建了哺乳细胞表达质粒pcDNA3.1(+)/hGH-hIL13-a和pcDNA3.1(+)/hGH-hIL13-g,为后续野生型及突变型hIL-13哺乳细胞的重组表达奠定了基础.
其他文献
一旦鸟类抵达北极区,迁徙鸟类必须调整其生理和行为以适应不可预知的雪盖、天气、食物资源和天敌胁迫.换言之,他们必须抵抗环境干扰(压力)以便尽早迁徙到苔原上的巢区并建立
碳纤维粗纱的生产及进一步加工成纤维增强复合材料的过程中会产生碳纤维长丝废料及卷曲织物、非卷曲织物的边角料.这些废料适合作为生产纤维增强复合材料所需的新型高质量材
目的 探讨糖化血红蛋白(HbA1c)检测在妊娠糖尿病(GDM)筛查中的应用价值.方法 选取在我院检查的孕24-28周孕妇226例,其中血糖正常120例,糖尿病106例,对其进行口服75g葡萄糖耐
目的:建立仙阳壮肾胶囊的微生物限度检查方法。方法:采用直接接种法和培养基稀释法测定仙阳壮肾胶囊对验证菌株的回收率,并对控制菌检查法进行验证。结果:仙阳壮肾胶囊以直接
目的:建立关节炎大鼠滑膜成纤维细胞和单核细胞共培养诱生破骨样细胞的方法,研究清络通痹颗粒对破骨样细胞分化、增殖的影响及机制.方法:分离佐剂性关节炎大鼠外周血单核细胞
目的:探讨罗格列酮对早期糖尿病肾病脂联素的影响.方法:80例2型糖尿病早期糖尿病肾病患者随机分为罗格列酮治疗组(A组40例)及对照组(B组40例),罗格列酮治疗组在糖尿病常规治
目前抗菌药物的不合理应用已成为公共卫生领域的重要问题,受到各部门的高度重视,其中围手术期抗菌药物的不合理应用现象尤为严重.通过查阅国内外相关文献,探讨围手术期抗菌药
目的 观察舒适护理干预对冠心病患者介入治疗术后心理和生活质量的效果分析.方法 将86例经冠状动脉介入术患者随机分为观察组和对照组各43例,观察组采用舒适护珲干预,对照组
目的 评价MRI检查对距骨缺血坏死早期诊断及治疗方法选择的价值.方法 对已确诊的12例距骨缺血坏死的MRI表现进行回顾性分析.结果 本组12例均行MRI检查.4例距骨早期坏死,病灶
目的 提出一种以对比敏感度曲线(contrast sensitivity function,CSF)为术后屈光状态评价标准的预测术后前房深度(anterior chamber depth,ACD)的方法.方法 建立个性化的人眼