论文部分内容阅读
作者简介：张翠玲（1971- ），女，副研究员，从事茶树无性系良种选育与推广工作。
摘要：植物的半致死温度（LT50）能较确切地反映植物的抗寒能力。本研究对13个茶树无性系品种及1个黄山群体种进行电导法配合Logistic方程求拐点温度，确定植物组织半致死温度，以确定各品种的抗寒性强弱。通过聚类分析， 浙农113、农抗早两个品种属高抗寒种质资源， 可作为耐寒性育种的基因材料，而仙寓早、平阳特早、春波绿3个品种的抗寒性较差，属不抗寒品种。
关键词：茶树；无性系；抗寒性；LT50
中图分类号：S571.101 文献标识号：A 文章编号：1001-4942（2013）06-0024-02
植物抗寒性的强弱是其自身对低温胁迫的一种反应，很大程度取决于遗传特性，但是也会随着外界条件的变化而产生变化。植物的抗寒性受多种因素影响，它的研究是一个复杂的过程。但是植物的半致死温度（LT50）能较确切地反映植物的抗寒能力。Lyons（1973）[1]指出，膜脂相变是低温胁迫的普遍反应。低温对膜的伤害可以导致电解质透出率的增加。Dexter等（1932）[2]采用电导法测定了植物抗寒性，该方法经过改进现已被广泛应用。目前用电导法配合Logistic方程求拐点温度，确定植物组织半致死温度，已成为普遍采用的试验方法[3，4]。本研究对13个无性系品种及1个黄山群体种[5～7]进行电导法配合Logistic方程求拐点温度，确定植物组织半致死温度，以确定各品种的抗寒性强弱，供茶农在生产实践中参考。 1 材料与方法
试验于2009年12月进行，每隔10天随机采集13个无性系品种及1个黄山群体种的顶芽下的第四片老叶，剪成约1 cm长的样段，用去离子水漂洗3次，每次15 min，用滤纸吸干水分。称取01 g装入试管，先在0℃下预冷10 min，然后接种冰晶，放于冰瓶内做系列低温处理。处理温度设置为0、-3、-6、-9、-12、-15、-18、-21℃。 处理1 h后取出，加4 ml去离子水，真空渗入15 min，振荡。加塞后于25℃静置3 h，再振荡，静置后在DDS-11A型电导率仪上测第1次电导率。然后置沸水浴中5 min，冷却后测第2次电导率。按下列公式计算相对电导率：
相对电导率（%）=（冰冻电导率/煮沸电导率）×100
相对电导率拟合Logistic回归方程为：
式中：y为细胞伤害率；K 为 细胞伤害率的饱和容量；a、b为方程参数。
21 不同低温处理下不同无性系品种叶片Logistic方程与LT50
2009年12月测定14个品种叶片的相对电导率，根据不同温度处理下的相对电导率、Logistic方程与拟合度，计算出各品种的半致死温度，见表1。
从表1可以看出，各品种模拟的Logistic方程拟合度均达到显著水平，以其作为半致死温度的模型是可靠的。14个茶树品种的半致死温度（LT50）为-684～-1152℃，差别比较大。其中抗寒性最强的品种是浙农113，其次是农抗早、中茶102等；抗寒性最差的是仙寓早、平阳特早。
22 茶树LT50的聚类分析
对茶树半致死温度进行系统聚类分析，结果见图1。
从图1可以看出，浙农113、农抗早分为一类，属抗寒性强的品种，中茶102、龙井43、中茶108、浙农117、浙农139、龙井长叶、福鼎大白茶、黄山群体种、乌牛早属于抗寒性中等的品种，而春波绿、平阳特早、仙寓早属于抗寒性差的品种。
3 结论
茶树原产于云南，其野生资源均属乔木、大叶型，而引种到北方地区的大面积栽培的却是灌木型中、小叶种。本试验中的13个无性系品种及1个黄山群体种其抗寒性是有差异的，半致死温度（LT50）为-684～-1152℃，差别比较大。电导法配合Logistic方程对13个茶树无性系及1个黄山群体种的抗寒性鉴定结果， 能较准确地反映出茶树的抗寒性强弱， 非常适用于茶树种质资源抗寒性基因筛选、茶树大量育种材料的早期抗寒性鉴定。通过聚类分析， 浙农113、农抗早两个品种属高抗寒种质资源， 可作为耐寒性育种的基因材料，而仙寓早、平阳特早、春波绿3个品种的抗寒性较差，属不抗寒品种，这对于生产实践以及抗寒育种均具有重要参考价值。
参 考 文 献：
[1] Lyons J M Chilling injury in plants[J]Annu RevPlant Physiol，1973，24：445-446
[2] Dexter S T，Tottingham W E ， Graber L F Investigations of the hardiness of plants by measurement of electrical condictivity[J] Plant Physiol，1932，7（1）： 63-78
[3] 许 宁 模糊综合评判在茶树种质资源抗寒性鉴定中的应用研究[J] 福建茶叶， 1993，3：16-19
[4] 王文举， 张亚红， 牛锦凤， 等 电导法测定鲜食葡萄的抗寒性[J]果树学报， 2007， 24（1）： 34-37
[5] 张翠玲，侯君合，王芝云，等青岛地区茶树无性系品种抗寒性比较试验[J]山东林业科技，2008，2：30-31
[6] 张翠玲，侯君合，胡维军，等几个适制卷茶的无性系茶树品种比较试验[J]山东农业科学，2009，12：40-42
[7] 张翠玲，胡维军，刘学才，等几个适制扁茶的无性系茶树品种引种试验[J] 山东农业科学，2009，3：51-54 山 东 农 业 科 学 2013，45（6）：26～29
摘要：植物的半致死温度（LT50）能较确切地反映植物的抗寒能力。本研究对13个茶树无性系品种及1个黄山群体种进行电导法配合Logistic方程求拐点温度，确定植物组织半致死温度，以确定各品种的抗寒性强弱。通过聚类分析， 浙农113、农抗早两个品种属高抗寒种质资源， 可作为耐寒性育种的基因材料，而仙寓早、平阳特早、春波绿3个品种的抗寒性较差，属不抗寒品种。
关键词：茶树；无性系；抗寒性；LT50
中图分类号：S571.101 文献标识号：A 文章编号：1001-4942（2013）06-0024-02
植物抗寒性的强弱是其自身对低温胁迫的一种反应，很大程度取决于遗传特性，但是也会随着外界条件的变化而产生变化。植物的抗寒性受多种因素影响，它的研究是一个复杂的过程。但是植物的半致死温度（LT50）能较确切地反映植物的抗寒能力。Lyons（1973）[1]指出，膜脂相变是低温胁迫的普遍反应。低温对膜的伤害可以导致电解质透出率的增加。Dexter等（1932）[2]采用电导法测定了植物抗寒性，该方法经过改进现已被广泛应用。目前用电导法配合Logistic方程求拐点温度，确定植物组织半致死温度，已成为普遍采用的试验方法[3，4]。本研究对13个无性系品种及1个黄山群体种[5～7]进行电导法配合Logistic方程求拐点温度，确定植物组织半致死温度，以确定各品种的抗寒性强弱，供茶农在生产实践中参考。 1 材料与方法
试验于2009年12月进行，每隔10天随机采集13个无性系品种及1个黄山群体种的顶芽下的第四片老叶，剪成约1 cm长的样段，用去离子水漂洗3次，每次15 min，用滤纸吸干水分。称取01 g装入试管，先在0℃下预冷10 min，然后接种冰晶，放于冰瓶内做系列低温处理。处理温度设置为0、-3、-6、-9、-12、-15、-18、-21℃。 处理1 h后取出，加4 ml去离子水，真空渗入15 min，振荡。加塞后于25℃静置3 h，再振荡，静置后在DDS-11A型电导率仪上测第1次电导率。然后置沸水浴中5 min，冷却后测第2次电导率。按下列公式计算相对电导率：
相对电导率（%）=（冰冻电导率/煮沸电导率）×100
相对电导率拟合Logistic回归方程为：
式中：y为细胞伤害率；K 为 细胞伤害率的饱和容量；a、b为方程参数。
21 不同低温处理下不同无性系品种叶片Logistic方程与LT50
2009年12月测定14个品种叶片的相对电导率，根据不同温度处理下的相对电导率、Logistic方程与拟合度，计算出各品种的半致死温度，见表1。
从表1可以看出，各品种模拟的Logistic方程拟合度均达到显著水平，以其作为半致死温度的模型是可靠的。14个茶树品种的半致死温度（LT50）为-684～-1152℃，差别比较大。其中抗寒性最强的品种是浙农113，其次是农抗早、中茶102等；抗寒性最差的是仙寓早、平阳特早。
22 茶树LT50的聚类分析
对茶树半致死温度进行系统聚类分析，结果见图1。
从图1可以看出，浙农113、农抗早分为一类，属抗寒性强的品种，中茶102、龙井43、中茶108、浙农117、浙农139、龙井长叶、福鼎大白茶、黄山群体种、乌牛早属于抗寒性中等的品种，而春波绿、平阳特早、仙寓早属于抗寒性差的品种。
3 结论
茶树原产于云南，其野生资源均属乔木、大叶型，而引种到北方地区的大面积栽培的却是灌木型中、小叶种。本试验中的13个无性系品种及1个黄山群体种其抗寒性是有差异的，半致死温度（LT50）为-684～-1152℃，差别比较大。电导法配合Logistic方程对13个茶树无性系及1个黄山群体种的抗寒性鉴定结果， 能较准确地反映出茶树的抗寒性强弱， 非常适用于茶树种质资源抗寒性基因筛选、茶树大量育种材料的早期抗寒性鉴定。通过聚类分析， 浙农113、农抗早两个品种属高抗寒种质资源， 可作为耐寒性育种的基因材料，而仙寓早、平阳特早、春波绿3个品种的抗寒性较差，属不抗寒品种，这对于生产实践以及抗寒育种均具有重要参考价值。
参 考 文 献：
[1] Lyons J M Chilling injury in plants[J]Annu RevPlant Physiol，1973，24：445-446
[2] Dexter S T，Tottingham W E ， Graber L F Investigations of the hardiness of plants by measurement of electrical condictivity[J] Plant Physiol，1932，7（1）： 63-78
[3] 许 宁 模糊综合评判在茶树种质资源抗寒性鉴定中的应用研究[J] 福建茶叶， 1993，3：16-19
[4] 王文举， 张亚红， 牛锦凤， 等 电导法测定鲜食葡萄的抗寒性[J]果树学报， 2007， 24（1）： 34-37
[5] 张翠玲，侯君合，王芝云，等青岛地区茶树无性系品种抗寒性比较试验[J]山东林业科技，2008，2：30-31
[6] 张翠玲，侯君合，胡维军，等几个适制卷茶的无性系茶树品种比较试验[J]山东农业科学，2009，12：40-42
[7] 张翠玲，胡维军，刘学才，等几个适制扁茶的无性系茶树品种引种试验[J] 山东农业科学，2009，3：51-54 山 东 农 业 科 学 2013，45（6）：26～29