【摘 要】
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目的 分析精氨酸酶(ARG)在细粒棘球蚴感染小鼠肝白细胞中的表达和功能. 方法 将18只雌性BALB/c小鼠随机分为感染组和对照组,每组9只.感染组小鼠腹腔注射细粒棘球蚴原头节2 00
【机 构】
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中国疾病预防控制中心寄生虫病预防控制所,国家热带病研究中心,世界卫生组织热带病合作中心,科技部国家级热带病国际联合研究中心,卫生部寄生虫病原与媒介生物学重点实验室,上海200025
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目的 分析精氨酸酶(ARG)在细粒棘球蚴感染小鼠肝白细胞中的表达和功能. 方法 将18只雌性BALB/c小鼠随机分为感染组和对照组,每组9只.感染组小鼠腹腔注射细粒棘球蚴原头节2 000个/鼠,对照组注射等量生理盐水.感染后270 d,分离小鼠肝组织中白细胞.蛋白质印迹(Western blotting)分析肝白细胞中ARG和一氧化氮合酶(NOS)的表达情况,采用Image J软件分析蛋白质表达丰度.ARG活性检测试剂盒、尿素检测试剂盒和一氧化氮(NO)检测试剂盒检测肝中白细胞的ARG活性、肝组织的尿素和NO含量.流式细胞术分析肝多种髓系细胞中ARG-1和T细胞中CD3ξ的表达情况.采用SPSS 20.0统计学软件进行数据分析. 结果 Western blotting检测结果显示,感染组小鼠肝白细胞中ARG-1表达的灰度值为1.03±0.01,高于对照组的0.12±0.01(P＜0.01);感染组小鼠肝白细胞中ARG-2和诱导型一氧化氮合酶(iNOS)表达的灰度值分别为0.54±0.01和0.64±0.02,对照组分别为0.55±0.02和0.59±0.02,差异均无统计学意义(P＞0.05).感染组小鼠肝白细胞中的ARG活性、肝组织中的尿素和NO含量分别为(0.03±0.00)U/ml、 (0.66±0.02) mmol/L和(14.63±1.55) μmol/L,对照组分别为(0.02±0.00) U/ml、 (0.04±0.01)mmol/L和(29.22±0.36) μmol/L,两组差异均有统计学意义(P＜0.05).流式细胞术分析发现,ARG-1在感染组小鼠肝白细胞中CD11b+CD11c+、CD11b+F4/80+、CD11b+Gr-1+、CD 11 b+Gr-1 +Ly-6C-Ly-6G+、CD 11 b+Gr-1 +Ly-6C+-Ly-6G-和CD11b+Ly-6G+中表达的相对平均荧光密度分别为1.41±0.12、1.21±0.06、1.52±0.16、1.30±0.03、1.58±0.12和1.21±0.04,均高于对照组的1.00±0.14、1.00±0.05、1.00±0.01、1.00±0.07、1.00±0.03和1.00±0.02(P＜0.05).CD3ξ在感染组小鼠肝CD4+和CD8+T细胞中表达的相对平均荧光密度分别为0.82±0.04和0.78±0.05,均低于对照组的1.00±0.05和1.00±0.07 (P＜ 0.05).结论 细粒棘球蚴感染小鼠肝白细胞中ARG-1表达增多,一定程度上拮抗NOS;肝CD4+和CD8+T细胞中CD3ξ表达下调.
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