中国结核分枝杆菌MPT64蛋白多态性及对MPT64抗原检测试剂盒的敏感性影响

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目的探讨中国结核分枝杆菌MPT64抗原的多态性及对其T/B细胞抗原表位的影响;应用MPT64抗原检测试剂盒对MPT64基因突变菌株和野生菌株进行检测,以进一步分析MPT64抗原多态性对结核感染检测的影响。方法从中国疾病预防控制中心传染病预防控制所结核室保存的2 346株国内结核分枝杆菌复合群临床分离株中挑选180株,对其MPT64基因扩增后进行序列比对,比较其T/B细胞抗原表位与非表位的多态性,对突变的菌株与野生菌株进行BACTEC MGIT 960系统与液体培养管进行培养,报阳后,用胶体金标记抗MPT64单克隆抗体采用免疫层析色谱法进行MPT64蛋白检测。结果 180株临床分离株中有15株(包括2株BCG菌株)表现有MPT64蛋白的多态性,占菌株数的8.33%,8株菌有63bp的缺失,4株菌有单位点的非同义突变,1株是单位点插入。MPT64基因的突变造成13个T细胞抗原表位(56.52%)和4个B细胞抗原表位(占80%)的改变,T/B细胞抗原表位区的dN/dS值均高于对应的非表位区。8株有63bp缺失的菌株胶体金检测阴性,对应的野生株检测阳性;5株单位点突变的菌株与对应的野生菌株胶体金检测均阳性。结论中国结核分枝杆菌MPT64蛋白存在多态性,这是产生抗原改变的原因之一,这会影响抗原相关功能的改变并引起免疫逃逸。63bp缺失会造成MPT64抗原检测试剂盒的假阴性,而某些单位点突变对检测效率无影响。
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