【摘 要】
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目的 应用抑制性消减杂交(SSH)技术构建乙型肝炎病毒(HBV)前-S1蛋白(preS1)反式激活蛋白1(PS1TP1)的相关基因cDNA消减文库,克隆PS1TP1反式激活相关基因,以期发现PS1TP1蛋白反式激活作用的靶位点.方法 以PS1TP1表达质粒PcDNA3.1(-)-PS1TP1转染HepG2细胞,以空载体pcDNA3.1(-)为对照;提取mRNA并逆转录为cDNA,进行两次消减杂交及
【机 构】
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100039,北京,解放军第三0二医院肝衰竭治疗研究中心,100039,北京,解放军第三0二医院肝衰竭治疗研究中心,100039,北京,解放军第三0二医院肝衰竭治疗研究中心,首都医科大学附属北京友谊医
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目的 应用抑制性消减杂交(SSH)技术构建乙型肝炎病毒(HBV)前-S1蛋白(preS1)反式激活蛋白1(PS1TP1)的相关基因cDNA消减文库,克隆PS1TP1反式激活相关基因,以期发现PS1TP1蛋白反式激活作用的靶位点.方法 以PS1TP1表达质粒PcDNA3.1(-)-PS1TP1转染HepG2细胞,以空载体pcDNA3.1(-)为对照;提取mRNA并逆转录为cDNA,进行两次消减杂交及两次抑制性PCR,将产物与pGEM-Teasy载体连接,构建cDNA消减文库.结果 文库扩增后得到90个阳性克隆,随机挑选43个克隆测序,并进行同源性分析,获得12种编码基因,其中10个为已知功能基因,另外2个为未知功能序列.结论 成功构建PS1TP1反式激活的相关基因cDNA消减文库,为今后进一步分析、研究病毒蛋白的致病机制奠定基础.为进一步研究PS1TP1蛋白的功能及其在HBV感染中的分子生物学机制提供理论依据和研究方法。
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目的 明确肝细胞凋亡与急性大鼠肝衰竭模型肝组织损伤程度的关系；明确BCL—X1过表达对急性肝衰竭大鼠肝脏的治疗保护作用。方法将60只Wistar大鼠随机分为正常对照组、模型组、处理组三组。正常对照组及模型组给予门静脉注射生理盐水，处理组予门静脉注射重组BCL-Xl腺病毒。预处理7d后模型组及处理组予D-氨基半乳糖＋脂多糖建立肝衰竭模型，观察各组大鼠的BCL-X1蛋白的表达、ALT、AST水平、肝细
目的 研究2008年北京市手足口病(Hand,foot and mouth disease,HFMD)患者中肠道病毒71型(Human enterovirus 71,HEV71)的VP1编码区基因特征.方法 采集北京市朝阳区医院和幼儿园的HFMD患者标本共285份,进行HEV71特异性RT-PCR鉴定和病毒分离,随机选取10株HEV71阳性分离株进行VP1编码区基因扩增和核苷酸序列测定和分析.结果
目的 了解不同时期湖南省人群甲型H1 N1流感病毒感染状况和评估方法.方法 在长沙市选择14个医疗卫生机构于2009年11月至2010年3月期间,先后5次进行甲型H1 N1流感病毒血凝抑制(HI)抗体阳性率快速调查,并与全省抽样调查结果 比较.结果 共有2131名对象参与快速调查,五次调查的全人群标准化抗体阳性率依次为9.32%、14.62%、31.08%、28.43%和22.80%;6～17岁年
目的 了解湖州地区乙肝疫苗免疫失败儿童病毒S基因型变异情况.方法 应用聚合酶链反应(PCR)方法对29例HBV-DNA阳性乙肝疫苗免疫失败儿童乙肝病毒S基因进行扩增,PCR扩增产物进行序列分析.结果 29例样本中测序结果显示,B基因型26例,C基因型3例,有9例样本在S区“a”决定簇发生变异,变异主要存在“a”决定簇内127、129、131、133、141、142、144等氨基酸位点.结论 湖州地
目的 TRIM家族是一类结构保守的蛋白家族，目前发现其包含70多种成员，参与了增值、分化、细胞凋亡及病毒与宿主的免疫应答等。TRIM38的功能尚不清楚。本研究拟通过实验确证TRIM38对核转录因子NF—KB活性的调节。方法在293T细胞中过表达TRIM38，采用荧光素酶报告系统检测TRIM38及其结构与缺失突变体对NF—KB启动子活性的影响。用WesternBlot方法检测TRIM38蛋白的表达。
目的 探讨慢性乙型肝炎患者接受聚乙二醇干扰素-2a(派罗欣)±核苷(酸)类似物(NUC)治疗前和治疗早期转氨酶明显升高者,联合双环醇(百赛诺)治疗的疗效.方法 收集HBeAg阳性/阴性慢性乙型肝炎患者,给予派罗欣180 μg,每周一次,皮下注射,疗程48周以上,治疗结束后随访26周.HBV DNA≥1×108拷贝/ml者联合NUC(阿德福韦或恩替卡韦).治疗前ALT＞ 500 U/L或派罗欣治疗第
2005年以来,研究人员又相继发现了新的与人类疾病相关的DNA病毒,包括属于细小病毒科的人博卡病毒(human bocavirus,HBoV,2005年[1])、人细小病毒4(human parvovirus 4,PARV4,2005年[2])与人细小病毒5(human parvovirus 5,PARV5,2006年[3]);属于多瘤病毒科的KI多瘤病毒(KI polyomavirus,KIPy
肝细胞癌( hepatocellular carcinoma,HCC)是危害人类健康的重要恶性肿瘤之一,全球发病率和死亡率逐年增长,发病率居于恶性肿瘤的第5位,死亡率位居第3位.全球每年大约有60万例新增患者,并有超过50万例患者死于肝细胞癌.肝细胞癌的发生和发展是多因素、多步骤的演变过程.HBV感染已被公认是HCC发病最主要的危险因素之一,与正常人群相比,HBV感染者尤其是慢性感染者患HCC的相
病毒检测在临床疾病诊断、食品安全、进出口检验检疫和生化武器检测等领域都有着广泛应用,现代分子诊断技术通过对蛋白、核酸或多肽等靶标生物分子进行检测实现对病毒的微量、快速检测,而生物标记技术是分子诊断不可或缺的研究手段[1],常见的生物标记物有放射性标记物[2]、酶标、显色标记物和荧光标记物[3 ]等,其中荧光标记物检测灵敏度高、易于定量检测而备受关注,传统的有机荧光染料易于淬灭,荧光稳定性差等原因,
丙型肝炎病毒(HCV)于1989年发现,是非甲非乙型肝炎的主要致病因素.没有特效药物,多数慢性患者约20年后将发展为肝硬化和肝癌[1]。