番木瓜eIF4E和eIFiso4E酵母双杂交诱饵表达载体的构建及自激活检测

来源 :热带生物学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：fanxingyi

【摘要】

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通过RT—PCR获得番木瓜eIF4E和eIFiso4E基因的编码区，将其分别克隆到pBD—GAL4载体中，构建酵母双杂交系统的诱饵载体pBD—GALA—eIF4E，pBD—GAL4-eIFiso4E。测序正确后，将重组质

【作者】

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吴金燕言普沈文涛周鹏

【机构】

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海南大学农学院,中国热带农业科学院热带生物技术研究所

【出处】

：

热带生物学报

【发表日期】

：

2010年1期

【关键词】

：

番木瓜 EIF4E eIFiso4E 酵母双杂交自激活检测 papaya eIFgE eIFiso4E yeast two-hybrid activati

【基金项目】

：

国家自然科学基金项目（30760134）,中央级公益性科研院所基本科研业务费资助项目（ITBBZD0732）

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通过RT—PCR获得番木瓜eIF4E和eIFiso4E基因的编码区，将其分别克隆到pBD—GAL4载体中，构建酵母双杂交系统的诱饵载体pBD—GALA—eIF4E，pBD—GAL4-eIFiso4E。测序正确后，将重组质粒导入YRG-2酵母菌株，检测其表达产物对酵母细胞有无毒性及对报告基因有无激活作用。结果表明，获得了正确的番木瓜eIF4E，eIFiso4E基因编码区，并成功克隆到pBD—GAL4诱饵载体中，且转化有诱饵载体的YRG-2在SD／-Trp营养缺陷平板上生长良好，在SD／-His-Trp营养缺

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