淫羊藿苷对钛颗粒诱导的炎症性骨溶解的抑制作用

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目的

探讨淫羊藿苷对钛颗粒诱导炎症性骨溶解的治疗作用。

方法

雄性C57BL/J6小鼠84只,按随机数字表法分为空白组、对照组、淫羊藿苷低剂量治疗组(L组)和高剂量治疗组(H组),每组21只。治疗组采用钛颗粒诱导小鼠颅骨溶解模型,并给予不同浓度的淫羊藿苷:L组0.1 mg·g-1·d-1,H组0.3 mg·g-1·d-1,持续至建模后14 d。采用显微CT评估骨溶解程度;HE染色观察细胞浸润程度;形态计量学测量骨溶解面积(EBS);抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色检测成熟破骨细胞;定量RT-PCR检测降钙素受体(CTR)、TRAP、组织蛋白酶K(Cath-K)和激活T细胞的核因子c1(NFATc1)基因mRNA含量;免疫组织化学检测肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)和IL-6的表达变化;酶联免疫吸附(ELISA)法检测核因子-κβ受体活化因子配体(RANKL)和骨保护素(OPG)的表达量。

结果

显微CT显示治疗组颅骨骨溶解现象明显减轻,骨密度、骨体积分数L组和H组分别为(89.44±18.51)mg/cm2、(48.32±9.54)%和(144.85±19.49)mg/cm2、(65.67±6.80)%,与对照组(61.23±13.41)mg/cm2、(27.83±7.51)%比较,差异有统计学意义(P<0.05)。HE染色表明,对照组骨膜内有大量巨噬样细胞,L组和H组炎症反应明显减轻。对照组EBS为(0.14±0.03)mm2,L组和H组EBS降为(0.07±0.01)mm2和(0.04±0.01)mm2(P<0.05)。对照组颅骨溶解侧可见大量TRAP阳性细胞,治疗后TRAP阳性细胞明显减少。免疫组织化学染色表明淫羊藿苷能抑制TNF-α、IL-1β和IL-6的表达。RT-PCR显示,钛颗粒上调CTR、TRAP、Cath-K和NFATc1基因mRNA表达,经治疗后上述基因mRNA表达水平较低,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。ELISA法检测结果显示,对照组RANKL和OPG的表达量分别为(23.02±4.39)pg/ml和(1 360.52±514.08)pg/ml,与治疗组[L组:(16.87±4.75)pg/ml、(1 890.54±550.94)pg/ml,H组:(12.80±5.77)pg/ml、(2 001.67±325.01)pg/ml]比较,差异有统计学意义(P<0.05)。

结论

淫羊藿苷能降低磨损颗粒引起的炎症反应,抑制破骨细胞活化,减轻骨溶解。

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