【摘 要】
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以海洋栖热菌(Oceanithermus sp.)DN-1基因组DNA为模板,通过PCR法扩增β-胡萝卜素15,15’双加氧酶BCMOTA基因,构建重组质粒,在大肠杆菌Escherichia coli BL21(DE3)中表达,并
【机 构】
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上海烟草集团技术中心北京工作站,郑州轻工业大学食品与生物工程学院
【基金项目】
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河南省高校科技创新人才项目(18HASTIT040)
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以海洋栖热菌(Oceanithermus sp.)DN-1基因组DNA为模板,通过PCR法扩增β-胡萝卜素15,15’双加氧酶BCMOTA基因,构建重组质粒,在大肠杆菌Escherichia coli BL21(DE3)中表达,并采用高效液相色谱(HPLC)法检测酶活性。结果表明,通过镍柱亲和层析和分子筛Sephacryl TM S-100,得到纯化重组β-胡萝卜素15,15’双加氧酶,十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析结果表明,该酶分子质量约35 kDa;该酶的最适温度为50℃,
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