【摘 要】
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目的构建小鼠精子特异性乳酸脱氢酶C4（mLDHC4）的原核表达载体并进行重组蛋白的纯化。方法提取小鼠睾丸组织总RNA,反转录合成cDNA。自行设计引物,PCR扩增mLDHC4的编码序列,产物
【机 构】
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福州南京军区福州总医院分子医学研究所
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目的构建小鼠精子特异性乳酸脱氢酶C4（mLDHC4）的原核表达载体并进行重组蛋白的纯化。方法提取小鼠睾丸组织总RNA,反转录合成cDNA。自行设计引物,PCR扩增mLDHC4的编码序列,产物经EcoRⅠ/BamHⅠ双酶切后,克隆至表达载体pET-28a（＋）中,获得重组载体。将重组载体转化大肠杆菌E.coliBL21（DE3）,用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷（IPTG）诱导mLDHC4表达,采用聚丙烯酰胺凝胶电泳和乳酸脱氢酶活性测定方法对重组mLDHC4进行鉴定,Ni＋-NTA亲和层析法纯化mLDHC4,
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