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目的 构建全人源化食管癌噬菌体单链抗体库，从中筛选Eca-109细胞特异性单链抗体。方法 取食管癌病人癌肿周围淋巴结作为B细胞的来源，提取总RNA，用RT-PCR的方法获得抗体可变区基因cDNA文库。首先分别网格筛选确定扩增VH和VL基因片段的引物对，以cDNA为模板扩增VH和VL基因片段，再以它们为模板分别扩增VH-linker与VL-linker，用SOE-PCR技术将后者组装成seFv，再引入酶切位点Sfi I和Not I。将scFv基因克隆人噬菌粒载体pCANTAB-5E后电转入Ecoli TG1