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为获得低密度脂蛋白受体配基结合结构域在甲醇酵母中的分泌表达,首先用RT-PCR方法以人肝癌Bel-7402总RNA为模板扩增了编码低密度脂蛋白受体配基结合结构域的基因片段.核酸测序分析表明克隆到的DNA片段的序列与报道的人LDLR的cDNA序列相同.然后构建了甲醇酵母表达质粒pPIC9K-sLDLr,并将其线性化后用电穿孔法导入Pichia pastorts GS115.分别用SDS-PAGE、Western blot和Ligand binding blot对GS115/pPIC9K-sLDLr上清中的重