硒代甲硫氨酸抗烟毒素蛋白衍生物的制备

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【摘要】

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为利用硒原子的反常散射获取抗烟毒素蛋白晶体X射线衍射的相位信息, 以质粒pQE-30为表达载体, E. coli M15 为宿主菌, 在含有硒代甲硫氨酸的M9培养基中用IPTG诱导表达硒代甲

【作者】

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何红珍陈宇航刘斌斌曹振波江凡刘一苇唐洪刘进元

【机构】

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清华大学生物科学与技术系结构生物学实验室

【出处】

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科学通报

【发表日期】

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2001年8期

【关键词】

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硒代甲硫氨酸抗烟毒素蛋白衍生物晶体表达纯化质谱制备

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为利用硒原子的反常散射获取抗烟毒素蛋白晶体X射线衍射的相位信息, 以质粒pQE-30为表达载体, E. coli M15 为宿主菌, 在含有硒代甲硫氨酸的M9培养基中用IPTG诱导表达硒代甲硫氨酸抗烟毒素蛋白衍生物. 通过Ni-NTA金属亲合层析和Mono Q阴离子交换层析纯化目标蛋白. 产物经SDS-PAGE检验纯度达95%以上, 经MALDI-TOF和ESI-Quadrupole质谱检测证实抗烟毒素蛋白硒代甲硫氨酸标记成功. 采用与抗烟毒素蛋白晶体生长类似的条件, 获得了衍生物可供衍射的晶体.

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