【摘 要】
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根据GenBank中大肠杆菌的marA基因序列设计引物,以大肠杆菌ATCC25922的基因组为模板,PCR扩增出约384 bp的marA基因片段,将所得片段与pMD18-T simple vector连接,转化至JM109
【机 构】
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新疆农业职业技术学院,张家产畜牧兽医工作站,吉林农业大学动物科学技术学院
【基金项目】
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国家自然科学基金项目（30400326）,吉林省科技发展计划项目（20010538,20030425,20050124）,吉林省教育厅项目（2005042）
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根据GenBank中大肠杆菌的marA基因序列设计引物,以大肠杆菌ATCC25922的基因组为模板,PCR扩增出约384 bp的marA基因片段,将所得片段与pMD18-T simple vector连接,转化至JM109大肠杆菌中,筛选阳性克隆,其质粒中插入序列测序结果与GenBank中报道一致。从阳性克隆中提取质粒,经BamHⅠ和XhoⅠ酶解,回收384 bp目的片段,定向克隆到pET-28a表达载体中,提取质粒,转化大肠杆菌BL21（DE3）中,获得阳性克隆。经IPTG诱导阳性菌,收集表达产物,通过
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