苦瓜核糖体失活蛋白MAP30基因的克隆及原核表达

来源 :四川农业大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：sysu_allan

【摘要】

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以载有银田牌长白苦瓜MAP30基因（YT-MAP30，Genebanka Ccession No：DQ643968）的质粒DNA（pMD-YT-MAP30）为模板，PCR扩增其成熟肽编码区YTm-MAP30，与原核表达载体pET-30a（＋）连接构建重组表达

【作者】

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杨洲平黄乾明刘一江陈平杨菲王晗光

【机构】

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四川农业大学生理科学与理学院

【出处】

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四川农业大学学报

【发表日期】

：

2007年3期

【关键词】

：

分子克隆基因表达 PCR 大肠杆菌 molecular cloning gene expression PCR Escherichia coli

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以载有银田牌长白苦瓜MAP30基因（YT-MAP30，Genebanka Ccession No：DQ643968）的质粒DNA（pMD-YT-MAP30）为模板，PCR扩增其成熟肽编码区YTm-MAP30，与原核表达载体pET-30a（＋）连接构建重组表达质粒pET-YTm-MAP30，酶切和测序鉴定后转化大肠杆菌BL21（DE3）PlysS感受态细胞，菌落PCR筛选鉴定阳性菌落。30℃培养阳性菌落，IPTG诱导表达不同时间，其表达产物用SDS～PAGE检测并进行可溶性分析。DNA测序结果表明重组质粒p

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